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pcr有杂带,疑似模板
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fddyn
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pcr有杂带,疑似模板
土壤微生物PCR后,总出现一条类似模板的条带,求解释
模板浓度和上样量见图片
2012-11-27.JPG
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2012-11-27 21:29:57
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Marado
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2012-11-28 13:47:51
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很有帮助, 已经减少上样量了,还是有,那再试试稀释吧
2012-11-28 18:39:55
既然疑似模板何不降低浓度再试试,不知道你是多少的Marker,模板是不是基因组,不过从片段的位置分析,应该是模板过浓了.
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Look,ifyouhadoneshot,oroneopportunity,toseizeeverythingyoueverwanted,inonemoment.Wouldyoucaptureit,orjustletitslip?
2楼
2012-11-28 08:52:57
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专业: 微生物生态学
引用回帖:
2楼
:
Originally posted by
Marado
at 2012-11-28 08:52:57
既然疑似模板何不降低浓度再试试,不知道你是多少的Marker,模板是不是基因组,不过从片段的位置分析,应该是模板过浓了.
我用的Marker是D2000
模板指的是基因组dna,模板上样量和浓度图中都标出来了
pcr反应体系是25ul的:引物 1ul
rTaq 12.5ul (是TAKARA的混酶)
H2O (就是25ul减模板、引物、和酶)
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3楼
2012-11-28 18:44:06
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bloodwar
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很有帮助, 谢谢
2012-11-29 19:39:14
不一定是模版啊,换个高分子量的marker试试,或者是只把模版来跑个电泳
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2012-11-29 06:01:32
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chenguestc
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很有帮助
2012-11-29 19:39:24
你的模板浓度太高了,当中那个图0.5ul 22.7ng 就没有类似基因组DNA的那条带,因此,可按照0.5ul 20ng 标准对样品进行稀释。
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5楼
2012-11-29 08:36:02
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