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高照李

木虫 (正式写手)

[求助] 求解PCR问题《忘记加水的前后》

我要扩增昆虫线粒体DNA的一个片段,前天做退火温度的梯度PCR实验时时侯忙中出错忘记加水了(需定容至50微升),扩出的结果用琼脂糖凝胶电泳检测时发现有3 个温度的样本有片段(40-52度的梯度,41.6度、48度和50度的有,41.6度的最亮),且和需要的大小相近,其它温度的样本则没有扩出。我又重新做了一遍退火温度的梯度PCR(所有试剂都加好了无遗漏),但什么也没出。
      请问这是什么原因?请问哪位大侠知道。
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weigh1111

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
呵呵,那你直接按照之前没加水的体系再试一次呗,顺便把扩出来的条带测个序~
6楼2012-11-23 08:33:06
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