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chenzhu198

铁杆木虫 (著名写手)


[交流] 大家来说说做southern blot时,基因组DNA的提取方法

做southern blot,对基因组DNA质量要求很高...希望大家一起交流下...我现在用CTAB法提取出来的DNA的质量还行,就是到酶切的时候基本都要切上24小时以上...希望大家多提意见!谢谢!
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chenzhu198

铁杆木虫 (著名写手)


引用回帖:
15楼: Originally posted by rfengyi at 2012-11-05 14:53:04
我没有用SDS提,用的是CTAB,水浴1h后先用Tris饱和酚抽一次,再用氯仿抽一次,抽完要上清分步加RNaseA Proteinase K,然后再一次酚,一次氯仿,最后异丙醇沉淀。不过沉淀出来的DNA是白色的。...

我也用的是ctab,但是我没有用过蛋白酶K,你提的DNA是做southern的么?提取出来的DNA的酶切怎样?我现在做的是植物的!
16楼2012-11-05 20:32:36
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rfengyi

禁虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
本帖内容被屏蔽

3楼2012-10-31 16:48:13
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chenzhu198

铁杆木虫 (著名写手)


引用回帖:
3楼: Originally posted by rfengyi at 2012-10-31 16:48:13
偶的还要48h,而且还没酶切完全,都不知道是什么原因,吸一点跑胶检测都没基因组的带了,可是全部点上去跑完发现还有,都不知道怎么办了

那你用的是什么方法提的基因组啊??
4楼2012-11-03 13:06:19
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
可以用试剂盒提一下,多次加酶
5楼2012-11-03 13:39:57
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