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关于DNA提取
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蛋白酶K-CTAB法 (1)加入DNA提取液,37度水浴1h; (2)加入蛋白酶K,37度水浴1h; (3)加入SDS,65度水浴1h; (4)离心,取上清; (5)加入氯仿异戊醇,离心,取上层液体,重复一次; (6)加入异丙醇沉淀过夜; (7)离心,弃上清,预冷乙醇洗涤两次,自然吹干,加ddH2O溶解即可。 溶菌酶法 (1)样品加入溶菌酶溶液(pH8.0),蛋白酶k,37℃,200r,1h; (2)加入裂解液,磷酸缓冲液,氯仿异戊醇,65℃,10min,离心取上清; (3)加入异丙醇,冰浴沉淀1h; (4)离心,加入预冷乙醇洗涤; (5)离心,弃上清,自然风干。 好心人给我讲讲这两种方法各自前三步的具体作用,和区别。 谢 |
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