应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 关于DNA提取
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
51/1返回列表
查看: 1456  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

qq677556

新虫 (初入文坛)

[交流] 关于DNA提取

蛋白酶K-CTAB法
（1）加入DNA提取液，37度水浴1h；
（2）加入蛋白酶K，37度水浴1h；
（3）加入SDS，65度水浴1h；
（4）离心，取上清；
（5）加入氯仿异戊醇，离心，取上层液体，重复一次；
（6）加入异丙醇沉淀过夜；
（7）离心，弃上清，预冷乙醇洗涤两次，自然吹干，加ddH2O溶解即可。
溶菌酶法
（1）样品加入溶菌酶溶液(pH8.0)，蛋白酶k，37℃，200r，1h；
（2）加入裂解液，磷酸缓冲液，氯仿异戊醇，65℃，10min，离心取上清；
（3）加入异丙醇，冰浴沉淀1h；
（4）离心，加入预冷乙醇洗涤；
（5）离心，弃上清，自然风干。
好心人给我讲讲这两种方法各自前三步的具体作用，和区别。
谢
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

科技

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2012-10-29 00:18:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

枫叶丹

新虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小丹木木: 金币+3, 鼓励交流 2012-10-29 16:04:18
蛋白酶K-CTAB法
DNA提取液：裂解菌体
蛋白酶K：降解天然蛋白质，去除DNA和RNA制备中的核酸酶
SDS：使蛋白质变性沉淀
溶菌酶法
溶菌酶溶液(pH8.0）：水解菌体细胞壁
裂解液：分解菌体细胞膜，使蛋白质变性
磷酸缓冲液：调解PH，易于DNA沉淀
氯仿异戊醇：使蛋白质变性，分离出dna
异丙醇:沉淀剂

我觉得这两种方法大同小异，用的原理都差不多，只是步骤上有所不同而已
赞一下 回复此楼
3楼2012-10-29 15:21:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

jl860822

金虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小丹木木: 金币+2, 热心的虫虫 2012-10-29 16:04:06
这个问题比较难回答，提取DNA无非就是先裂解细胞，然后加DNase抑制剂以防止DNA降解，然后加蛋白酶去蛋白，然后把DNA沉淀出来，通常会有一个37℃水浴去RNA的过程，至于方法的区别，建议去找一本分子克隆看一下
赞一下 回复此楼
2楼2012-10-29 14:54:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liuyuetq

木虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
个人认为 如果是提取细菌的DNA 第二种方法更适合革兰氏阳性菌
赞一下 回复此楼
4楼2012-10-30 08:35:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小小逍遥人

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
蛋白酶K是一种切割活性较广的丝氨酸蛋白酶，在pH 4到pH 12的条件下均有活性，在SDS、尿素或EDTA存在时亦很稳定。
赞一下 回复此楼
5楼2012-10-30 14:01:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0817化工学硕调剂 +6 努力上岸中！ 2026-03-31 6/300 2026-03-31 09:37 by zhshch
[考研] 0710生物学求调剂！ +3 叙述文 2026-03-31 3/150 2026-03-31 09:35 by longlotian
[考研] 335求调剂 +3 321* 2026-03-31 3/150 2026-03-31 09:00 by 功夫疯狂
[考研] 一志愿食品科学与工程083200求调剂 +4 XQTJZ 2026-03-30 4/200 2026-03-31 04:10 by fmesaito
[考研] 求收留 +6 1943443204 2026-03-28 6/300 2026-03-30 20:37 by dick_runner
[考研] 一志愿厦门大学材料工程专硕354找调剂！！！ +5 贝呗钡钡 2026-03-30 5/250 2026-03-30 18:16 by 无际的草原
[考研] 329求调剂 +8 星野? 2026-03-26 8/400 2026-03-30 13:41 by chemdavid
[考研] 318求调剂 +7 陈晨79 2026-03-30 7/350 2026-03-30 10:49 by 探123
[考研] 343求调剂085601 +3 要努力学习x 2026-03-29 3/150 2026-03-29 18:35 by wxiongid
[考研] 356求调剂 +4 gysy?s?a 2026-03-28 4/200 2026-03-29 10:32 by 唐沐儿
[考研] 330分求调剂 +5 qzenlc 2026-03-29 5/250 2026-03-29 07:37 by 无际的草原
[考研] 343求调剂 +5 爱羁绊 2026-03-28 5/250 2026-03-28 20:53 by 唐沐儿
[考研] 394求调剂 +3 好事多磨静候佳� 2026-03-26 5/250 2026-03-28 14:24 by 唐沐儿
[考研] 085405 考的11408求各位老师带走 +3 Qiu学ing 2026-03-28 3/150 2026-03-28 09:19 by 乐呵呵的追梦人
[考研] 求调剂推荐 材料 304 +15 荷包蛋hyj 2026-03-26 15/750 2026-03-28 04:13 by fmesaito
[考研] 295求调剂 +5 1428151015 2026-03-27 6/300 2026-03-28 04:04 by fmesaito
[考研] 352分 化工与材料 +5 海纳百川Ly 2026-03-27 5/250 2026-03-28 03:39 by fmesaito
[考研] 266求调剂 +11 阳阳哇塞 2026-03-27 12/600 2026-03-27 17:56 by yu221
[考研] 298调剂 +3 jiyingjie123 2026-03-27 3/150 2026-03-27 11:57 by wxiongid
[考研] 一志愿武理085500机械专业总分300求调剂 +3 an10101 2026-03-24 7/350 2026-03-25 00:00 by 山鬼0-
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭