应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 关于DNA提取
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
51/1返回列表
查看: 1452  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

qq677556

新虫 (初入文坛)

[交流] 关于DNA提取

蛋白酶K-CTAB法
（1）加入DNA提取液，37度水浴1h；
（2）加入蛋白酶K，37度水浴1h；
（3）加入SDS，65度水浴1h；
（4）离心，取上清；
（5）加入氯仿异戊醇，离心，取上层液体，重复一次；
（6）加入异丙醇沉淀过夜；
（7）离心，弃上清，预冷乙醇洗涤两次，自然吹干，加ddH2O溶解即可。
溶菌酶法
（1）样品加入溶菌酶溶液(pH8.0)，蛋白酶k，37℃，200r，1h；
（2）加入裂解液，磷酸缓冲液，氯仿异戊醇，65℃，10min，离心取上清；
（3）加入异丙醇，冰浴沉淀1h；
（4）离心，加入预冷乙醇洗涤；
（5）离心，弃上清，自然风干。
好心人给我讲讲这两种方法各自前三步的具体作用，和区别。
谢
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

科技

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2012-10-29 00:18:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

piaoyingaza

木虫 (著名写手)
用试剂盒吧，效率比较高
赞一下 回复此楼
8楼2012-10-30 21:42:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

jl860822

金虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小丹木木: 金币+2, 热心的虫虫 2012-10-29 16:04:06
这个问题比较难回答，提取DNA无非就是先裂解细胞，然后加DNase抑制剂以防止DNA降解，然后加蛋白酶去蛋白，然后把DNA沉淀出来，通常会有一个37℃水浴去RNA的过程，至于方法的区别，建议去找一本分子克隆看一下
赞一下 回复此楼
2楼2012-10-29 14:54:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

枫叶丹

新虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小丹木木: 金币+3, 鼓励交流 2012-10-29 16:04:18
蛋白酶K-CTAB法
DNA提取液：裂解菌体
蛋白酶K：降解天然蛋白质，去除DNA和RNA制备中的核酸酶
SDS：使蛋白质变性沉淀
溶菌酶法
溶菌酶溶液(pH8.0）：水解菌体细胞壁
裂解液：分解菌体细胞膜，使蛋白质变性
磷酸缓冲液：调解PH，易于DNA沉淀
氯仿异戊醇：使蛋白质变性，分离出dna
异丙醇:沉淀剂

我觉得这两种方法大同小异，用的原理都差不多，只是步骤上有所不同而已
赞一下 回复此楼
3楼2012-10-29 15:21:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liuyuetq

木虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
个人认为 如果是提取细菌的DNA 第二种方法更适合革兰氏阳性菌
赞一下 回复此楼
4楼2012-10-30 08:35:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿北化085600材料专硕275|有文章专利｜求调剂 +12 Micky11223 2026-03-25 13/650 2026-03-31 09:36 by longlotian
[考研] 266分，求材料相关专业调剂 +8 哇呼哼呼哼 2026-03-30 10/500 2026-03-31 09:28 by zhshch
[考研] 08工科求调剂286 +5 tgs_001 2026-03-28 5/250 2026-03-31 08:18 by 一只好果子?
[考研] 285求调剂 +6 AZMK 2026-03-30 9/450 2026-03-31 08:01 by jp9609
[考研] 332求调剂 +14 032500 2026-03-25 14/700 2026-03-30 20:03 by 无际的草原
[有机交流] 考研调剂 +8 watb 2026-03-26 8/400 2026-03-30 18:40 by 544594351
[考研] 材料化工340求调剂 +3 jhx777 2026-03-30 3/150 2026-03-30 17:54 by JourneyLucky
[考研] 求调剂 +7 青春裁为三截 2026-03-29 7/350 2026-03-30 13:14 by laoshidan
[考研] 295求调剂 +5 wei-5 2026-03-26 5/250 2026-03-30 08:34 by 探123
[考研] 086000生物与医药调剂 +5 Feisty。 2026-03-28 9/450 2026-03-29 12:02 by longlotian
[考研] 332求92调剂 +8 蕉蕉123 2026-03-28 8/400 2026-03-29 10:46 by 周梓丹
[考研] 0703化学调剂，求导师收 +9 天天好运来上岸� 2026-03-24 10/500 2026-03-28 22:17 by chemzp
[考研] 压国家一区线，求导师收留，有恩必谢！ +7 迷人的哈哈 2026-03-28 7/350 2026-03-28 16:47 by 催化大白
[考研] 341求调剂 +7 青柠檬1 2026-03-26 7/350 2026-03-27 00:19 by wxiongid
[考研] 求调剂 一志愿 本科 北科大 化学 343 +6 13831862839 2026-03-24 7/350 2026-03-26 22:57 by 不吃魚的貓
[考研] 309求调剂 +4 gajsj 2026-03-25 5/250 2026-03-26 00:27 by Dyhoer
[考研] 07化学303求调剂 +5 睿08 2026-03-25 5/250 2026-03-25 22:46 by 418490947
[考研] 296求调剂 +4 汪！？！ 2026-03-25 7/350 2026-03-25 16:41 by 汪！？！
[考研] 300分，材料，求调剂，英一数二 +5 超赞的 2026-03-24 5/250 2026-03-24 21:07 by 星空星月
[考研] 080500求调剂 +3 zzzzfan 2026-03-24 3/150 2026-03-24 16:38 by barlinike
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭