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qq677556

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
帖子: 14
在线: 4.3小时
虫号: 1834564

[交流] 关于DNA提取

蛋白酶K-CTAB法
（1）加入DNA提取液，37度水浴1h；
（2）加入蛋白酶K，37度水浴1h；
（3）加入SDS，65度水浴1h；
（4）离心，取上清；
（5）加入氯仿异戊醇，离心，取上层液体，重复一次；
（6）加入异丙醇沉淀过夜；
（7）离心，弃上清，预冷乙醇洗涤两次，自然吹干，加ddH2O溶解即可。
溶菌酶法
（1）样品加入溶菌酶溶液(pH8.0)，蛋白酶k，37℃，200r，1h；
（2）加入裂解液，磷酸缓冲液，氯仿异戊醇，65℃，10min，离心取上清；
（3）加入异丙醇，冰浴沉淀1h；
（4）离心，加入预冷乙醇洗涤；
（5）离心，弃上清，自然风干。
好心人给我讲讲这两种方法各自前三步的具体作用，和区别。
谢

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