| 查看: 1295 | 回复: 6 | |||
[求助]
Western总蛋白提取时需要胞内蛋白和一个膜上受体蛋白，要不要最后一步高速离心？已有2人参与
|
|
我以前的方法是 弃原培养基---预冷PBS漂洗---刮刀收集至1.5mlEP管---1000rpm离心5min---预冷PBS洗涤---2000rpm离心5min---弃尽管内液体，加入60ul裂解液---冰上裂解30min---12000rpm离心5min---收集上清得总蛋白溶液 今天老师说这样会损失我需要的那个膜上受体蛋白，换方法 弃原培养基---预冷PBS漂洗---加入100ul裂解液，冰上5min---刮刀收集至EP管，冰上10min 老师意思不要最后一步高速离心 以免损失膜蛋白 总觉得这样做心里没底 求助前线战友们的意见 |
回复此楼» 猜你喜欢
论文投稿，期刊推荐
已经有6人回复
-
寻求一种能扛住强氧化性腐蚀性的容器密封件
已经有3人回复
-
请问哪里可以有青B申请的本子可以借鉴一下。
已经有4人回复
-
真诚求助：手里的省社科项目结项要求主持人一篇中文核心，有什么渠道能发核心吗
已经有6人回复
-
孩子确诊有中度注意力缺陷
已经有14人回复
-
请问下大家为什么这个铃木偶联几乎不反应呢
已经有5人回复
-
请问有评职称，把科研教学业绩算分排序的高校吗
已经有5人回复
-
2025冷门绝学什么时候出结果
已经有3人回复
-
天津工业大学郑柳春团队欢迎化学化工、高分子化学或有机合成方向的博士生和硕士生加入
已经有4人回复
-
康复大学泰山学者周祺惠团队招收博士研究生
已经有6人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
急求 多谢 关于大肠杆菌菌体总蛋白的提取
已经有5人回复- 做western 如何提蛋白可同时获得膜蛋白和胞内蛋白
已经有11人回复
- 有没有人用Western blot在做17kDa蛋白质,求经验！！！
已经有22人回复
- 提取细胞蛋白
已经有14人回复
- 提膜受体蛋白做western，
已经有3人回复
- 大肠杆菌表达蛋白提取总不成功，求助高手指教！
已经有5人回复
- Western Blot实验的蛋白条带都连在一起
已经有37人回复
- 【资料】植物总蛋白提取方法
已经有80人回复
- Western Blot电泳蛋白质外漏问题求助
已经有22人回复
- 【求助】WB中，核蛋白内参和总蛋白内参的问题
已经有12人回复
- 【求助/交流】什么是核蛋白什么是总蛋白？做western的时候有什么区别？
已经有7人回复
- 【求助/交流】细胞核内蛋白和细胞浆蛋白提取有什么区别？
已经有4人回复
- 【分享】高人整理的细胞总蛋白的提取
已经有17人回复
- Western Blot 磷酸化蛋白测定问题
已经有9人回复
2楼2012-10-29 15:09:38
jiangyinshen
木虫 (著名写手)
- 应助: 31 (小学生)
- 金币: 2207.2
- 红花: 1
- 帖子: 2442
- 在线: 128.6小时
- 虫号: 990634
- 注册: 2010-04-07
- 专业: 生殖生物学
3楼2012-10-30 10:18:52
seasonin
银虫 (小有名气)
- 应助: 3 (幼儿园)
- 金币: 809.7
- 散金: 10
- 帖子: 131
- 在线: 60小时
- 虫号: 894674
- 注册: 2009-11-05
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
4楼2013-12-18 10:44:31
5楼2014-02-13 21:42:21
jurkat.1640
至尊木虫 (文坛精英)
- BioEPI: 2
- 应助: 905 (博后)
- 金币: 16463.5
- 散金: 1654
- 红花: 120
- 沙发: 39
- 帖子: 14449
- 在线: 2169.9小时
- 虫号: 514340
- 注册: 2008-02-28
- 性别: GG
- 专业: 病毒学
6楼2014-02-14 11:13:42
7楼2014-02-14 13:31:56