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Western总蛋白提取时需要胞内蛋白和一个膜上受体蛋白，要不要最后一步高速离心？ 已有2人参与
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我以前的方法是 弃原培养基---预冷PBS漂洗---刮刀收集至1.5mlEP管---1000rpm离心5min---预冷PBS洗涤---2000rpm离心5min---弃尽管内液体，加入60ul裂解液---冰上裂解30min---12000rpm离心5min---收集上清得总蛋白溶液 今天老师说这样会损失我需要的那个膜上受体蛋白，换方法 弃原培养基---预冷PBS漂洗---加入100ul裂解液，冰上5min---刮刀收集至EP管，冰上10min 老师意思不要最后一步高速离心 以免损失膜蛋白 总觉得这样做心里没底 求助前线战友们的意见 |
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