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南方科技大学公共卫生及应急管理学院2026级博士研究生招生报考通知(长期有效)
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gwd0312

木虫 (正式写手)

“无冕之王”

【答案】应助回帖

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1949stone: 回帖置顶 2012-09-28 11:32:20
1949stone: MolEPI+1, ok 2012-09-28 11:32:27
1、 DH5a是一种常用于质粒克隆的菌株。E.coli DH5a在使用pUC系列质粒载体转化时,可与载体编码的β-半乳糖苷酶氨基端实现α-互补。可用于蓝白斑筛选鉴别重组菌株。JM109菌株在使用pUC系列质粒载体进行DNA转化或用M13 phage载体进行转染时,由于载体DNA产生的LacZa多肽和JM09编码的LacZΔM15进行α-互补,从而显示β-半乳糖苷酶活性,由此很容易鉴别重组体菌株。
2、严格来说,蓝白斑筛选还是要做的,筛选出白班之后再做PCR验证,这样假阳性概率就小。
3、选择酶切位点很重要,不光要切下来,下一步还要能连接上去,查阅文献是对的,好好筛选,挑选常见的,经济的,连接效率高的。
持之以恒、永不放弃!
3楼2012-09-28 11:12:46
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