应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 蛋白纯化遇到问题
51/1返回列表
查看: 1430  |  回复: 15
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

淡竹2066

铜虫 (小有名气)

[求助] 蛋白纯化遇到问题

各位虫友，大家好！我最近在做可溶性蛋白的诱导表达，好不容易表达出来，但是纯化的时候没摸好条件，洗脱时没有把杂蛋白去除干净，我还能再将洗脱下来的蛋白重新上柱再洗脱一次吗？
为我用的宿主菌是革兰氏阳性菌，每次超声破碎都很麻烦，要好几个小时，而且我的要求不高，只要能纯化到我的目的蛋白就行。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-09-23 09:09:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

乱舞成影

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-09-24 10:24:35
最主要的先是超声破碎一定要完全 。
上柱子的时候建议金属亲和柱，可能效果好一些。
要不你再做一个透析吧 透析液里加点甘油。。。
赞一下 回复此楼
8楼2012-09-23 14:39:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 16 个回答

Jorming033

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
淡竹2066: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-09-25 16:45:17
电泳之后蛋白一般都已经变性了，不能在层析。但你如果用原始混有杂蛋白的原溶液是可以再次层析纯化的。
赞一下 回复此楼
论文命运真多折，希望是好事多磨，祈求好运
2楼2012-09-23 09:16:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

水凝胶

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-09-24 10:24:22
淡竹2066: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-09-25 16:45:31
可以，我们实验室的可溶性蛋白是过两次柱子，凝胶柱和金属亲和柱，你可以尝试用不同的柱子。你的蛋白好杂最好在上样处理一下，比如说盐析之类的，
赞一下 回复此楼
3楼2012-09-23 10:05:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小神龙198901

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
淡竹2066: 金币+1, ★有帮助 2012-09-25 16:45:48
可以的，或者你也可以再跑下非变性电泳，应该也是没问题的

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下 回复此楼
加油你能行
4楼2012-09-23 10:42:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 16 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 8月时间戳变的，举个手。玩一下，释放压力 +10 archvillain 2026-08-04 12/600 2026-08-10 12:45 by yudaoqian88
[基金申请] 我的国基提前知道中了，可是同事的操作让我实在接受不了，怎么会有这样的人 +5 家与远方 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:45 by 家与远方
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] FileCode能看出啥？ +3 要乐观耀哥 2026-08-10 6/300 2026-08-10 12:33 by 要乐观耀哥
[基金申请] 2026国自然放榜时间 +9 布布和一二 2026-08-08 9/450 2026-08-10 11:22 by xxxx2020
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +5 布布和一二 2026-08-07 5/250 2026-08-09 16:15 by 袁向阳007
[基金申请] fileCode有新解读？ +10 Tide man 2026-08-08 18/900 2026-08-09 12:55 by 仁砚薪传
[考博] 【2027博士申请】纳米药物递送方向 20+3 13586093586 2026-08-03 5/250 2026-08-08 21:54 by 13586093586
[基金申请] 关于豆爷回答的JTJC与%2F数量 +5 yang182083 2026-08-06 7/350 2026-08-08 18:29 by zhanghaozhu
[基金申请] 好奇怪的filecode +3 布布和一二 2026-08-08 4/200 2026-08-08 17:46 by zhanghaozhu
[基金申请] 基金中了 +14 laoda193707 2026-08-06 14/700 2026-08-08 00:23 by 实验小白ha
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] 娱乐 +6 Tide man 2026-08-03 6/300 2026-08-07 22:40 by 铁帽子农民
[基金申请] 固定端突然变了，今天 +6 archvillain 2026-08-06 10/500 2026-08-07 16:03 by 医学老男孩
[基金申请] filecode变化情况 +6 布布和一二 2026-08-07 22/1100 2026-08-07 14:45 by 且听虎啸
[基金申请] 大家散了吧，后缀研究没有意义，别浪费时间了，过好目前的每一天，不要焦虑 +5 Tide man 2026-08-06 7/350 2026-08-07 13:11 by 医学老男孩
[基金申请] filecode +8 布布和一二 2026-08-06 11/550 2026-08-06 20:41 by tangpu318
[基金申请] 求各位大神看下 100+6 hpkpkpkp 2026-08-05 33/1650 2026-08-06 14:49 by zhiyanjiang
[基金申请] 好消息？这个有何含义？？？ +8 Tide man 2026-08-05 10/500 2026-08-05 16:14 by xmuxiaoyu
[基金申请] 纯娱乐，不喜欢勿喷 +7 Tide man 2026-08-04 10/500 2026-08-04 15:10 by loufangrui
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭