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jerryzyy

金虫 (小有名气)

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[求助] T-RFLP技术中，真菌的PCR问题已有1人参与

T-RFLP技术中，大家真菌PCR都用的什么引物啊，我用的ITS1F/ITS4,一直都P不出来，要不是弥散状的条带，要不是二聚体，能参考一下大家的的体系和程序吗？我做的是土壤真菌的，不胜感激！

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1楼2012-09-02 08:43:57

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jmlilan

新虫 (初入文坛)

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小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-11-08 13:39:57

引用回帖:

5楼: Originally posted by jerryzyy at 2012-10-03 10:28:46
我之前有一段时间是有目的条带出现的，但是上下都有拖带，再调条件的话就又成弥散状的带了，我把酶什么的都换了还是不行，之前是用的镁离子分装的，后来又换成不分装的了，都不行，你现在能P才出来吗...

我前两天换了个体系P出来了两次，也和你的情况差不多，目的条带还可以但是有非特异性条带、引物二聚体和拖尾。我再P就P不出来了，要么是弥散状要么是只有二聚体，很郁闷。能参考下你之前P出来的体系和条件吗