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lixilei1314金虫 (小有名气)
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[求助]
双酶切后目的条带的疑问？
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如何： 小弟最近在做重组质粒的双酶切，然后连接。 1，连接以后转化BL21培养基筛选，老是不长细菌，基本上平板上一个细菌都不长，不知道是什么原因？没连接好？ 2，看我双酶切的条带，PET-28双酶切之后条带很暗很暗（3ul的上样量），同样，第一个和第二个的目的条带也很暗，第三个目的条带比较亮。请问各位大侠这样的条带可以割胶回收做连接吗？ 3， 为什么双酶切之后，克隆载体亮度会比目的条带的亮度亮很多呢？按说他们的浓度应该是一样的啊？  |
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