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金虫 (正式写手)

[求助] 荧光定量没有结果可能的原因

我刚开始做荧光定量PCR，结果很不好，溶解曲线没有主峰出现都是一些乱七八糟的小峰，这是不是说明没有扩增产物啊，但是将荧光定量PCR后的产物跑电泳条带却很清晰，有哪位大侠知道造成此种现象的原因？另外扩增曲线也不出现Ct值，循环次数都到45了，不知道这又有哪些因素造成呢？愁啊、、、、、

1楼 2012-08-18 16:56:26

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新虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
20111987: 金币+5, ★有帮助 2012-08-20 08:32:40

三个原因吧：1 模板质量不好
2 引物不好，重新设计引物吧
3退火温度不合适

2楼2012-08-18 23:26:07

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金虫 (正式写手)

引用回帖:

2楼: Originally posted by woshizhufeng at 2012-08-18 23:26:07
三个原因吧：1 模板质量不好
2 引物不好，重新设计引物吧
3退火温度不合适

O(∩_∩)O谢谢，终于找到原因了，原来是用的管与实时荧光定量PCR仪不匹配，呵呵

3楼2012-08-21 15:36:24

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新虫 (小有名气)

引用回帖:

3楼: Originally posted by 20111987 at 2012-08-21 15:36:24
O(∩_∩)O谢谢，终于找到原因了，原来是用的管与实时荧光定量PCR仪不匹配，呵呵...

祝你实验顺利

4楼2012-08-22 08:16:01

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