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vivian26

银虫 (小有名气)

[求助] 关于RNA电泳的一些疑惑

作为分子生物学的初学者,我最近准备做RNA电泳,有一些疑惑,在这里向各位大人们请教,希望得到解答。:
1、RNA电泳是否可以直接使用琼脂糖胶?我看到很多人说应该使用变性胶。
2、RNA电泳的loading buffer与Marker是否是专有的?可不可以直接使用DNA电泳的呢?
3、电泳之后很多人说会出现三条带。是三条带一起出现吗?有没有亮度的区别呢?
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qiaoxianying

银虫 (初入文坛)

回答:1.用百分之一的琼脂糖凝胶就可以,但要DEPC过夜处理的1*TAE,并高压灭菌
        2.buffer和DL2000是通用的,但使用前也要DEPC处理
        3.如果提取成功的话是有三条带
6楼2012-08-11 23:13:21
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qiaoxianying

银虫 (初入文坛)

这是RNA吗,右边三条有基因组污染,杂质太多,建议你重新提取,你把具体步骤说一下,我帮你看看
7楼2012-08-11 23:19:03
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qiaoxianying

银虫 (初入文坛)

提取步骤第二步可以不用,刚发过来的图右边三条带下面是5s,上面是基因组条带,说明你RNA里有DNA污染,可以适当加大trizol用量,第一步处理时间延长到10min
11楼2012-08-12 00:47:02
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