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酵母提取基因组有几步不懂，求各位帮忙！！！
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蜗牛酶反复冻融法提取酵母基因组 1 收集过夜培养16～18h 的菌体1.5mL，加入500μLPBS 溶液重悬菌体，12000r/min 离心2min，用PBS 重洗一次 2 将沉淀溶于35μL 的蜗牛酶溶液中，加入65μL的PBS，45℃作用2h，加100μL 裂解液，－ 20℃冷冻，然后室温振荡溶解，反复3 次 3 向悬浮液中加入150μL 5mol/L KAc(pH8.9)轻轻混匀，然后10000r/min 离心5min. 4 取上清液，加入两倍体积的无水乙醇，轻轻混匀，室温放置5min； 5 12000r/min 离心10min，将沉淀溶解在100μL TE 中；加入等体积的酚- 氯仿- 异戊醇(体积比25:24:1)，轻柔颠倒混匀，12000r/min 离心5min， 6 重复抽提1 次 7 ，加1/10 体积的3mol/L 醋酸钠(pH5.2)，2.5 倍体积的无水乙醇，－ 20℃放置30min； 8 10000r/min离心5min，弃上清液，用70% 乙醇溶液洗涤沉淀两次。 9 室温干燥后用20μL TE 溶解；加入0.5μL 10mg/mL 的RNaseA，37℃温浴30min，自然冷却后保存 求解：其中第三步加入150μL 5mol/L KAc(pH8.9)和第四步加入两倍体积的无水乙醇的作用是什么？ |
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3楼2012-08-07 20:34:52
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