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stewart3261铜虫 (小有名气)
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RT-PCR相关问题
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大神帮我！ 目前在做心脏组织的逆转录PCR。遇到的问题，首先用trizol提取总RNA，测其吸光度比值260/280在1.5左右，远大不到1.8-2.0。有人说是因为我用DEC水稀释做空白，用TE会好些，暂时还没有实践。比值小于1.8应该是有蛋白污染吧？然后如果继续做下面的逆转录和扩增有什么影响呢？ 扩增时问题，内参表达不好（内参为gapdh）。并且阴性对照管也有表达！？ct值在25到28左右！这个问题是不是很严重？ 大神指导一下吧！ 用的枪头，EP管都是直接购买的无酶的产品，有一段时间了。会不会应经被污染有RNA酶呢？ |
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