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天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen

[交流] 【求助/交流】求助:关于基因敲除后对下游基因的影响相关问题? 已有4人参与

如图,下面三个基因是负向的,有一个共同的启动子,在基因3的右边,如果我现在利用插入敲除的方法将基因2破坏掉了,那么对于基因1有什么样的影响?会不会导致基因1不表达或者表达减少?

请大家从理论上和实际上提提建议!

小弟不胜感激啊!
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Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献

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scelab(金币+5):牛 2011-01-03 22:53:11
我个人认为可能影响比较小,比如用GFP或者RFP来做报告基因的例子中,都是将报告基因插在promoter与目的基因中间共用一个启动子。这个情况跟你的踢除一个基因的情况貌似没有什么大的差别。
The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
2楼2011-01-03 22:36:03
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

★ ★ ★ ★ ★ ★
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scelab(金币+5):牛 2011-01-03 22:53:17
你做下实验验证就知道了
一般而言是不会的
不过分子这东西,纯理论层面是能随便扯的……能解释就好
3楼2011-01-03 22:52:06
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天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen

引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2011-01-03 22:52:06:
你做下实验验证就知道了
一般而言是不会的
不过分子这东西,纯理论层面是能随便扯的……能解释就好

敢问下游实验如何来进行验证?

我现在将基因2已经敲除掉了,可是测出的表型与预测不一致!这是怎么回事?
Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
4楼2011-01-03 23:15:19
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

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dhd997(金币+3):good 2011-01-04 09:15:02
引用回帖:
Originally posted by 天使托 at 2011-01-03 23:15:19:

敢问下游实验如何来进行验证?

我现在将基因2已经敲除掉了,可是测出的表型与预测不一致!这是怎么回事?

这就得根据1、3基因的特性来设计实验了
RT-PCR和WB,其实也不好说,如果表达了基因片段,也有机会检测到
如果知道1、3的功能看看有没有相应的表型就好了

基因型和表型不一定只有唯一对应关系的~~某个基因残了,其他的可能会有代偿性的表达,然后导致出现其他不一样的表型
5楼2011-01-04 00:19:45
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梦想起飞

铜虫 (小有名气)

★ ★ ★
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dhd997(金币+2):欢迎交流 2011-01-04 12:23:01
我咋觉得影响会很大呢。我是在想如果你插入的片段不是3的倍数,那就把读码框移动改变了呀,那编码出来的蛋白肯定面目全非了啊。不知道有无道理……呵呵
6楼2011-01-04 12:01:18
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