24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 1118  |  回复: 5
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

襄阳蓉儿

新虫 (小有名气)

[交流] 小女子新人一枚,初做巢式PCR,出了点儿问题,求助! 已有3人参与

师兄做的p出来的条带很亮很好,为什么我做的阳性对照有条带而且非常的弱,我的样品啥都没有,郁闷啊!!!
两步pcr都是25微升的体系,12.5微升的酶,上下游引物都是0.5微升,模版是2微升。。。哪里出问题了,难道是我的操作?
点样飘出来了还是什么?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

少壮不努力,长大pcr
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

reallpf

木虫 (正式写手)

补充一下,如果你的模版是基因组或者PCR产物,2uL量有点大,也需要调整。如果有电泳图最好了。
4楼2012-07-15 17:39:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

l68266152

银虫 (小有名气)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
scelab: 金币+2, 谢谢交流 2012-07-15 17:13:55
电泳图片传上来看看,你所谓的12.5ul的是mix吧?不是酶吧?阳性对照是用什么做的对照?各个组分有没有充分融化?引物有没有问题?
相信自己
2楼2012-07-15 16:02:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

reallpf

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你用的应该是2 X mix,那应该很好P出来啊。不过看你的条件应该出在引物的量,25uL的体系一般加2uL引物,个人建议。另外PCR结果不好时也要根据结果从PCR条件来考虑,同时你也可以减小PCR体积来试试。
3楼2012-07-15 17:38:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

313638350

铁虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你师兄搞怪 在里面加了东西
5楼2012-07-15 23:28:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 总分293求调剂 +6 加一一九 2026-03-25 9/450 2026-03-29 13:40 by 加一一九
[考研] 332求调剂 +8 蕉蕉123 2026-03-28 8/400 2026-03-29 10:46 by 周梓丹
[考研] 356求调剂 +4 gysy?s?a 2026-03-28 4/200 2026-03-29 10:32 by 唐沐儿
[考研] 各位老师好,我的一志愿为北京科技大学085601材料专硕 +8 Koxui 2026-03-28 8/400 2026-03-29 09:50 by laoshidan
[考研] 材料学硕333求调剂 +11 北道巷 2026-03-24 11/550 2026-03-29 08:31 by fmesaito
[考研] 0703化学 +11 妮妮ninicgb 2026-03-27 11/550 2026-03-29 06:45 by 544594351
[考研] 压国家一区线,求导师收留,有恩必谢! +7 迷人的哈哈 2026-03-28 7/350 2026-03-28 16:47 by 催化大白
[考研] 一志愿北京工业大学,324分求调剂 +4 零八# 2026-03-28 4/200 2026-03-28 15:01 by 17865157980
[考研] 283求调剂 +7 A child 2026-03-28 7/350 2026-03-28 12:05 by zllcz
[考研] 一志愿南昌大学324求调剂 +7 hanamiko 2026-03-27 7/350 2026-03-28 09:56 by 李上岸0921
[考研] 张芳铭-中国农业大学-环境工程专硕-298 +4 手机用户 2026-03-26 4/200 2026-03-28 07:17 by mmm just
[考研] 070300化学求调剂 +4 起个名咋这么难 2026-03-27 4/200 2026-03-27 21:39 by 83503孙老师
[考研] 285求调剂 +4 AZMK 2026-03-27 7/350 2026-03-27 20:59 by AZMK
[考研] 一志愿南师大0703化学 275求调剂 +4 Ripcord上岸 2026-03-27 4/200 2026-03-27 17:00 by zhyzzh
[考研] 材料调剂 +8 匹克i 2026-03-23 8/400 2026-03-27 08:11 by hypershenger
[考研] 294分080500材料科学与工程求调剂 +4 柳溪边 2026-03-26 4/200 2026-03-26 21:14 by XPU李庆
[考研] 085602化学工程求调剂。 +4 平乐乐乐 2026-03-26 4/200 2026-03-26 17:57 by fmesaito
[考研] 289求调剂 +17 硕星赴 2026-03-23 17/850 2026-03-26 16:18 by 不吃魚的貓
[考研] 机械学硕总分317求调剂!!!! +4 Acaciad 2026-03-25 4/200 2026-03-25 19:59 by hanserlol
[考研] 一志愿北化315 求调剂 +3 akrrain 2026-03-24 3/150 2026-03-24 19:35 by 了了了了。。
信息提示
请填处理意见