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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 蛋白质诱导表达
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lqs075

银虫 (初入文坛)

[求助] 蛋白质诱导表达 已有1人参与

本人最近在做EGFP蛋白（绿色荧光蛋白）诱导表达，载体是公司买来的pMD18-T，用的诱导剂是IPTG（终浓度为1mM），诱导时间很长，有12个小时，但是诱导前后蛋白质的表达量是一样的！为什么会这样呢？怎么样才能提高它的表达量呢？求高手指导～～～急
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1楼 2012-06-13 00:15:11
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xiongyaoling

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-06-13 13:49:55
lqs075: 金币+2, ★有帮助 2012-06-17 16:15:32
你用的载体是用于克隆的，如果要表达蛋白的话，要用表达载体才对。目前用的多的原核表达载体多是PET系统，我就用这个成功表达过EGFP蛋白，表达量很高的。
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5楼2012-06-13 10:41:00
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qjy_134

铜虫 (小有名气)
你是否需要构建到表达载体
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2楼2012-06-13 08:08:51
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elvias

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-06-13 13:49:43
lqs075: 金币+5, ★有帮助 2012-06-17 16:15:19
如果我没理解错的话，你是用pMD18-T用来表达蛋白的吧，但是pMD18-T是克隆载体不是表达载体，你如果要表达蛋白的话需要将克隆载体上的基因片段切下来再连到表达载体上
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3楼2012-06-13 08:24:59
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chlorella409

木虫 (正式写手)
pMD18-T………………
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4楼2012-06-13 09:06:12
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