应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » M-MLV反转录最大多长片段
51/1返回列表
查看: 1149  |  回复: 3
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

注定飞翔

银虫 (初入文坛)

[求助] M-MLV反转录最大多长片段

M-MLV反转录酶一般能有效反转录多长片段，我有个4K多的RNA片段能否一次反转录拿到全长CDNA
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-06-11 20:38:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bbwalkman

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
注定飞翔: 金币+5, ★★★很有帮助 2012-06-13 19:01:18
引用回帖:
3楼: Originally posted by 注定飞翔 at 2012-06-12 15:23:06
我用的是英骏的，想从dsRNA通过RT-PCR获取CDNA,不知你有没有用过这种酶呀，可行否？...

你说呢这个我没用过，不过应该都是一样的吧，你如果是双链的话你得考虑解链，然后你的primer才能结合，这样在温度上是不是你就需要进行修改了。另外，我用的这个酶好像温度太高（70℃以上）会失活，所以你用的时候要注意primer和你的模板杂交的时候先不要加酶。。。不过还是看看你的说明书呢。。。祝实验顺利
赞一下 回复此楼
4楼2012-06-12 18:01:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 4 个回答

bbwalkman

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+5, 鼓励应助 2012-06-12 13:36:04
应该是没有问题的，不知道你的酶是不是TaKaRa的，我用的M-mlv（RNase H-），可用于较长的cDNA合成以及高比例的全长cDNA文库的构建。而且它的说明书里面有举例说明，通过转录产物分别扩增了1kb、3kb、5kb、8kb和10kb的目的DNA片段，另外它也对4.4kb的RNA进行了RT-PCR。所以说，你呢4kb多的RNA应该是没有问题的。
赞一下 回复此楼
2楼2012-06-11 21:35:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

注定飞翔

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by bbwalkman at 2012-06-11 21:35:06
应该是没有问题的，不知道你的酶是不是TaKaRa的，我用的M-mlv（RNase H-），可用于较长的cDNA合成以及高比例的全长cDNA文库的构建。而且它的说明书里面有举例说明，通过转录产物分别扩增了1kb、3kb、5kb、8kb和10kb ...

我用的是英骏的，想从dsRNA通过RT-PCR获取CDNA,不知你有没有用过这种酶呀，可行否？
赞一下 回复此楼
3楼2012-06-12 15:23:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 4 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭