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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PCR扩增出一次再扩增不出来
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wslwsl521

新虫 (初入文坛)

[求助] PCR扩增出一次再扩增不出来

之前用一种PCR体系扩增出自己和别人的条带。然后用同样的条件就扩增不出来了。然后重新换了一种体系，能p出来，但是P出来一次之后，再重新P又P不出来了。哪位高手指点一下，是什么原因造成的。
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1楼 2012-06-09 09:58:17
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生物大虫

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-06-11 17:28:09
第一次你P不出来是体系的问题，第2次你重新设计体系P了几次?每次都P不出来吗？你把体系的各种成分重新换新的再P，逐一排查可能造成该结果的因素吧，依我的经验极大可能是DNA模版、引物反复溶融降解了~~
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谋事在人成事在天
6楼2012-06-11 17:12:04
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chiden

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
每次换体系就可以P出来了吗？第二次就完全没有条带了？还是条带不好，只是部分有呢？
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即使难过，也要微笑着走下去
2楼2012-06-09 22:42:26
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nemo88

禁虫 (小有名气)
★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流，今天很活跃嘛 2012-06-11 13:57:03
本帖内容被屏蔽
3楼2012-06-09 22:48:41
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suifeng91

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
如果条件都一致，试剂材料都没有换，那么前后两次PCR的时间间隔有多久？个人觉得是材料可能有些问题，比如模板，引物，等
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人生不是一场物质的盛宴，而是一次灵魂的修炼，使它在谢幕之时比开幕之初更为高尚。
4楼2012-06-11 10:08:27
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