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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PCR扩增出一次再扩增不出来
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wslwsl521

新虫 (初入文坛)

[求助] PCR扩增出一次再扩增不出来

之前用一种PCR体系扩增出自己和别人的条带。然后用同样的条件就扩增不出来了。然后重新换了一种体系，能p出来，但是P出来一次之后，再重新P又P不出来了。哪位高手指点一下，是什么原因造成的。
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1楼 2012-06-09 09:58:17
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Marado

金虫 (正式写手)

Dreamer

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-06-11 13:57:17
1：体系是不是变化了，我得过50ul体系P不出来，25ul体系P的出来的情况.
2：确定引物，酶是不是失活了
3：PCR仪器不同，结果也会有一点不太一样，但是可能性不大
所以，试试1,2吧.
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Look,ifyouhadoneshot,oroneopportunity,toseizeeverythingyoueverwanted,inonemoment.Wouldyoucaptureit,orjustletitslip?
5楼2012-06-11 10:47:20
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chiden

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
每次换体系就可以P出来了吗？第二次就完全没有条带了？还是条带不好，只是部分有呢？
赞一下 回复此楼
即使难过，也要微笑着走下去
2楼2012-06-09 22:42:26
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nemo88

禁虫 (小有名气)
★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流，今天很活跃嘛 2012-06-11 13:57:03
本帖内容被屏蔽
3楼2012-06-09 22:48:41
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suifeng91

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
如果条件都一致，试剂材料都没有换，那么前后两次PCR的时间间隔有多久？个人觉得是材料可能有些问题，比如模板，引物，等
赞一下 回复此楼
人生不是一场物质的盛宴，而是一次灵魂的修炼，使它在谢幕之时比开幕之初更为高尚。
4楼2012-06-11 10:08:27
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