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h411470316

铁虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
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在线: 54分钟
虫号: 1742497
注册: 2012-04-07
专业: 动物遗传学

[求助] PCR体系不同，扩不出片段

请问，同样的引物、模板、rTaq酶，我用10ul体系PCR后电泳可以看到条带，而改成20或者50ul体系却电泳没条带或者很微弱，这是为什么？

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1楼 2012-06-06 20:48:40

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生物大虫

金虫 (小有名气)

应助: 17 (小学生)
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注册: 2011-11-15
性别: GG
专业: 动物资源与保护

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

PCR本来就是个奇妙的、人为的模拟人体生化过程，受内外因素影响很大。比如说你本来根据25uL体系能够跑出很亮的条带，但是你跑50uL体系就并不是把所有成分加倍这么简单了，需要重新设计最佳的条件，总之多跑跑梯度，多揣摩吧

谋事在人成事在天

4楼2012-06-07 15:31:34

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