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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PCR体系不同，扩不出片段
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h411470316

铁虫 (初入文坛)

[求助] PCR体系不同，扩不出片段

请问，同样的引物、模板、rTaq酶，我用10ul体系PCR后电泳可以看到条带，而改成20或者50ul体系却电泳没条带或者很微弱，这是为什么？
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1楼 2012-06-06 20:48:40
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果子么么茶

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
就算同一体系 同一模板 结果都有可能不同 模板加入体积一样 实际还是有差异的 介个RP啊
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2楼2012-06-06 21:22:06
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beer胖

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
很正常
分子操作本来就捉摸不定
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3楼2012-06-07 14:31:09
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生物大虫

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
PCR本来就是个奇妙的、人为的模拟人体生化过程，受内外因素影响很大。比如说你本来根据25uL体系能够跑出很亮的条带，但是你跑50uL体系就并不是把所有成分加倍这么简单了，需要重新设计最佳的条件，总之多跑跑梯度，多揣摩吧
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谋事在人成事在天
4楼2012-06-07 15:31:34
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h411470316

铁虫 (初入文坛)
会不会与使用通用引物有关系？
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5楼2012-06-07 19:02:16
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