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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » SOE pcr目的条带很暗，非特异条带很亮？
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qiannianchao

金虫 (初入文坛)

[求助] SOE pcr目的条带很暗，非特异条带很亮？

引物12:1000bp左右；
引物34:500bp左右；
重叠部分长度：40bp左右；
反应条件：50-52℃退火45s，延伸7min，一开始10-15个循环，然后加了1和4引物，30-40个循环；
得到的电泳结果总是：出现非特异性条带，大小600bp左右，而且很亮！但是目的条带处却很暗，无法回收。
请教高手这种情况是什么原因造成的，需要怎么样改善，在线等待。。
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1楼 2012-06-06 14:42:09
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quietorange

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by qiannianchao at 2012-06-14 12:44:25
已经出来结果了，谢谢

能说说最后怎么做出来的吗？我现在遇到同样的问题，虽然有目的条带，但是非特异性带和smear都挺严重的。
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6楼2012-06-27 16:47:30
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