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hit_yanglab

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助:植物蛋白SDS-PAGE跑胶问题

求助各位老师同学~
做植物蛋白的SDS-PAGE,胶跑的特别慢,上次跑了7个多小时还没跑到底,这次又很慢,平均一小时能跑不到1cm的样子,请教各位这样正常么?有可能是啥原因啊?上样前加loading buffer煮5min,配胶用的是碧云天的SDS-PAGE凝胶配置试剂盒,产品编号P0012A。

小女纸这厢有礼了~
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37wangsaiq

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 37wangsaiq at 2012-06-06 08:49:14
你的电流电压多大?我们的一般恒流20~30mA(一块胶),上层电压70V,下层140V左右,1~2h就跑完了。你的目的蛋白分子量多大?

3L 说的对,胶浓度也有影响,我们用6%、8%、12%的分离胶一般,你用多大的?
5楼2012-06-08 11:30:02
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37wangsaiq

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-06-08 14:11:47
你的电流电压多大?我们的一般恒流20~30mA(一块胶),上层电压70V,下层140V左右,1~2h就跑完了。你的目的蛋白分子量多大?
2楼2012-06-06 08:49:14
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hit_yanglab

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 37wangsaiq at 2012-06-06 08:49:14
你的电流电压多大?我们的一般恒流20~30mA(一块胶),上层电压70V,下层140V左右,1~2h就跑完了。你的目的蛋白分子量多大?

我提取的是甜菜叶片的蛋白,目前没有目的蛋白,跑完染色,看下蛋白表达差异,我也在猜想是不是甜菜里面的蛋白分子量太大了。

恒压跑80v,120V,后来加到过150,当时看了下电流,最高30mA左右,后来降到15左右
3楼2012-06-06 10:50:46
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szhwf-china

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
此外,胶浓度大小影响移动速度。
4楼2012-06-08 10:00:07
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