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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求助：植物蛋白SDS-PAGE跑胶问题
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hit_yanglab

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助：植物蛋白SDS-PAGE跑胶问题

求助各位老师同学~
做植物蛋白的SDS-PAGE，胶跑的特别慢，上次跑了7个多小时还没跑到底，这次又很慢，平均一小时能跑不到1cm的样子，请教各位这样正常么？有可能是啥原因啊？上样前加loading buffer煮5min，配胶用的是碧云天的SDS-PAGE凝胶配置试剂盒，产品编号P0012A。

小女纸这厢有礼了~
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1楼 2012-06-05 20:20:44
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hit_yanglab

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 37wangsaiq at 2012-06-06 08:49:14
你的电流电压多大？我们的一般恒流20~30mA(一块胶)，上层电压70V，下层140V左右，1~2h就跑完了。你的目的蛋白分子量多大？

我提取的是甜菜叶片的蛋白，目前没有目的蛋白，跑完染色，看下蛋白表达差异，我也在猜想是不是甜菜里面的蛋白分子量太大了。

恒压跑80v，120V，后来加到过150，当时看了下电流，最高30mA左右，后来降到15左右
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3楼2012-06-06 10:50:46
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37wangsaiq

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-06-08 14:11:47
你的电流电压多大？我们的一般恒流20~30mA(一块胶)，上层电压70V，下层140V左右，1~2h就跑完了。你的目的蛋白分子量多大？
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2楼2012-06-06 08:49:14
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szhwf-china

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
此外，胶浓度大小影响移动速度。
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4楼2012-06-08 10:00:07
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37wangsaiq

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 37wangsaiq at 2012-06-06 08:49:14
你的电流电压多大？我们的一般恒流20~30mA(一块胶)，上层电压70V，下层140V左右，1~2h就跑完了。你的目的蛋白分子量多大？

3L 说的对，胶浓度也有影响，我们用6%、8%、12%的分离胶一般，你用多大的？
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5楼2012-06-08 11:30:02
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