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芥末猫

银虫 (小有名气)

[求助] 原核表达载体构建,测序不成功

郁闷死了,构建原核表达载体,提质粒电泳检测是大于两千,又用目的基因的引物做pcr检测,条带正确,然后送测序,告诉我可能是空载。。。。。。。
要是空载的话我pcr还能有目的条带吗?这个构建了好久了,一直没成功,快疯了
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504775490

金虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-06-06 13:46:35
这张测序图谱确实不怎么好,按楼主的说法应该是构建成功了,你可以送个菌液给公司,或者是换一家公司。我前几天也送质粒去测序了,也说有两个样测序失败,不过这个公司给返工重测了,结果测出来了,也有可能是公司的问题!我是跟诺塞测的序,他家服务不错,仅供参考!
3楼2012-06-05 20:41:23
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芥末猫

银虫 (小有名气)

这里还有张测序失败的图片,懂的给看看吧,谢谢啊


2楼2012-06-05 18:55:49
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lanjb1013

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
如果,经常构建的话,建议你用载体的通用引物检测。
4楼2012-06-05 23:27:36
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caoluoyuan

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
做过对照吗?空载能否扩增出条带?
5楼2012-06-06 08:09:30
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