24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 3848  |  回复: 22
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

auau96

新虫 (小有名气)

[求助] 酿酒酵母基因敲除实验顺利需多少时间 已有2人参与

大家好  我现在在做酿酒酵母基因敲除  利用左右同源臂各390bp和540bp  因为本身菌株遗传背景不清楚  MARKER基因既不是抗性基因和也不是缺陷型基因     用能表达的酶基因做筛选标记   不知各位前辈是否有此类实验经验来敲除目的基因   
实验顺利大概需多少时间能完成
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

iaminxanadu

木虫 (正式写手)

纤维素酶基因复杂。保证有活性、且能胞外表达(分泌或细胞表面展示)的前提下,可以用纤维素为唯一碳源筛选。

想在敲除一基因同时,构建纤维素利用的工程菌想法可行。但涉及到很多基础的问题。如果是这样思路的话,在验证了理论可行后,就先试试吧
个人感觉有难度。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

10楼2012-06-07 08:38:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 23 个回答

iaminxanadu

木虫 (正式写手)


rainwander: 金币+1, 鼓励交流 2012-06-06 21:29:42
不知酶基因是什么,选择不好效率太差了。你可以用一些显性的遗传标记啊,比如抗G418的基因作为筛选标记。这样的话,把同源序列克隆到标记上下游,酶切一下,一次就筛选出来。
2楼2012-06-05 13:41:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

caoluoyuan

金虫 (正式写手)


rainwander: 金币+1, 鼓励交流 2012-06-06 21:29:36
是不是采用Cre/loxP系统?PUG6系统质粒,G418选择标记?
这就是同源重组原理,应该在3-6个月可以搞定,我之前有搞过这个,用的是Cre/loxP系统
3楼2012-06-05 14:57:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

caoluoyuan

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
rainwander: 金币+1, 鼓励交流 2012-08-23 18:03:00
是不是采用Cre/loxP系统?PUG6系统质粒,G418选择标记?
这就是同源重组原理,应该在3-6个月可以搞定,我之前有搞过这个,用的是Cre/loxP系统
4楼2012-06-05 14:58:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 303求调剂 +10 SereinQ 2026-04-10 11/550 2026-04-11 11:35 by AA小小木虫
[考研] 调剂 +5 青灯不负 2026-04-09 5/250 2026-04-11 09:59 by zhq0425
[考研] 277 数一104,学硕,求调剂 +19 瓶子PZ 2026-04-09 21/1050 2026-04-11 09:39 by 逆水乘风
[考研] 本科南方医科大学 一志愿985 药学学硕284分 求调剂 +4 弱水听文 2026-04-09 4/200 2026-04-10 22:01 by doctff
[考研] 314求调剂 +18 xhhdjdjsjks 2026-04-09 19/950 2026-04-10 18:53 by HPUCZ
[考研] 环境专硕调剂 +16 会说话的肘子 2026-04-06 16/800 2026-04-10 10:30 by asy1wn
[考研] 085600材料与化工,求调剂 +11 won_qii 2026-04-07 11/550 2026-04-09 17:03 by luoyongfeng
[考研] 286求调剂 +19 Faune 2026-04-08 20/1000 2026-04-09 08:36 by 哦哦123
[考研] 270求调剂 +3 031127 2026-04-06 4/200 2026-04-08 21:00 by 逆水乘风
[考研] 一志愿吉大化学327求调剂 +12 王王白石 2026-04-06 13/650 2026-04-08 16:05 by luoyongfeng
[考研] 336求调剂,一志愿中科大 +9 墨彧 yuyu 2026-04-06 9/450 2026-04-08 11:24 by 想读书的菌菌
[考研] 265求调剂 +19 小木虫085600 2026-04-06 21/1050 2026-04-08 10:38 by 逆水乘风
[考研] 263分B区求调剂 +6 李nihao 2026-04-08 6/300 2026-04-08 09:38 by 南开小綦
[考研] 材料工程专业日语生求调剂 +9 111623 2026-04-07 9/450 2026-04-07 23:31 by 一只好果子?
[考研] 288环境专硕,求调材料方向 +35 lllllos 2026-04-04 39/1950 2026-04-07 23:24 by 一只好果子?
[考研] 机械调剂 +3 zzzbcb 2026-04-07 3/150 2026-04-07 22:19 by hemengdong
[考研] 一志愿苏州大学材料工程(085601)专硕有科研经历三项国奖两个实用型专利一项省级立项 +11 大火山小火山 2026-04-05 11/550 2026-04-06 22:55 by yunlongyang
[考研] 求调剂 +7 张.1 2026-04-05 7/350 2026-04-05 20:40 by 啵啵啵0119
[考研] 男生,一志愿沪9生物学071000,初试308求调剂 +3 刘墨墨 2026-04-04 3/150 2026-04-05 08:26 by barlinike
[考研] 调剂 +4 是可乐不是可乐 2026-04-04 4/200 2026-04-04 19:41 by 唐沐儿
信息提示
请填处理意见