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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 蛋白表达量的提高
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675250244

银虫 (小有名气)

[交流] 蛋白表达量的提高

最近用pET32a为载体表达一蛋白（30多KD），发现产量太低了，想通过优化培养基配方（如添加甘油等）提高其表达量，但一直不见效果，求解答。
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1楼 2012-06-05 08:44:56
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675250244

银虫 (小有名气)
引用回帖:
14楼: Originally posted by chz16160520 at 2012-06-06 22:34:37
无论你怎么折腾有些蛋白的表达量就是那么低，我现在就是！你可以尝试换一下菌种，或者用酵母来表达（如果基因来源于真核生物）

我的是一个原核生物的抗原，连上了CTB佐剂，用的载体是pET32a，菌株是BL21（DE3），现在表达的量总共有50mg/L,其中以包涵体形式表达占了一半，我想提高表达量同时增加以可溶性形式表达
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15楼2012-06-07 08:24:19
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克隆大虾

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★ ★
675250244(金币+1): 谢谢参与
scelab: 金币+2, 谢谢回复哦~ 2012-06-06 23:01:28
优化温度；IPTG浓度；实在不行只能进行密码子优化.
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8楼2012-06-05 13:05:41
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caoluoyuan

金虫 (正式写手)
★
675250244(金币+1): 谢谢参与
诱导型表达载体，增加诱导剂的量是促进表达的方法，试试看
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9楼2012-06-05 14:47:20
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flownaway

铁杆木虫 (正式写手)
★
675250244(金币+1): 谢谢参与
加入IPTG，优化一下诱导的浓度、时间和温度，再试试从对数期开始诱导
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12楼2012-06-06 11:35:33
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依窗赏月5楼
2012-06-05 09:08   回复  
675250244(金币+1): 谢谢参与
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