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675250244

银虫 (小有名气)

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[交流] 蛋白表达量的提高

最近用pET32a为载体表达一蛋白（30多KD），发现产量太低了，想通过优化培养基配方（如添加甘油等）提高其表达量，但一直不见效果，求解答。

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1楼 2012-06-05 08:44:56

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flownaway

铁杆木虫 (正式写手)

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★
675250244(金币+1): 谢谢参与

加入IPTG，优化一下诱导的浓度、时间和温度，再试试从对数期开始诱导

12楼2012-06-06 11:35:33

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克隆大虾

铁杆木虫 (著名写手)

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★ ★ ★
675250244(金币+1): 谢谢参与
scelab: 金币+2, 谢谢回复哦~ 2012-06-06 23:01:28

优化温度；IPTG浓度；实在不行只能进行密码子优化.

8楼2012-06-05 13:05:41

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caoluoyuan

金虫 (正式写手)

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★
675250244(金币+1): 谢谢参与

诱导型表达载体，增加诱导剂的量是促进表达的方法，试试看

9楼2012-06-05 14:47:20

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chz16160520

银虫 (小有名气)

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★
675250244(金币+1): 谢谢参与

无论你怎么折腾有些蛋白的表达量就是那么低，我现在就是！你可以尝试换一下菌种，或者用酵母来表达（如果基因来源于真核生物）

14楼2012-06-06 22:34:37

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简单回复

依窗赏月5楼

2012-06-05 09:08 回复

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