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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 高效液相洗脱
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xiaohong88

银虫 (小有名气)

[求助] 高效液相洗脱

各位好：
       我现在在利用高效液相进行活性物质的分离，用了等度洗脱，结果效果不好，想改试用梯度洗脱，但不知道这梯度应该是从大到小，还是从小到大？这跟物质的极性有关吗？我现在在用碳十八柱子，物质的极性属于中等偏大。
      谢谢！
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不断追逐自己的梦想！
1楼 2012-06-04 08:46:06
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痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
极性从高到低。方便调控物质保留时间。
流动相从高到低，即有机相比例逐渐升高，系统洗脱能力逐渐增强。
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守候在风中的宁静。
2楼2012-06-04 09:14:31
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hanshuang

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
发一个现在等度的图过来看看，把原流动相标上。
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3楼2012-06-04 09:22:18
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xiaohong88

银虫 (小有名气)
再补充一下，我之前用的等度洗脱中的流动相是甲醇跟水，有机溶剂的比例从大到小，结果出峰时间比较早，而且物质基本上都堆在一块。
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不断追逐自己的梦想！
4楼2012-06-04 09:24:01
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645329775
5楼2012-06-04 14:38:10
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zfhist

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

用甲醇（A pump）和超纯水（B pump）冲洗柱子，A:B依次为：90:10（15min）、80:20（5min）、60:40（5min）、40:60（5min）、20:80（5min）和10:90（5min）。
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认认真真做人，踏踏实实做事！
6楼2012-06-14 21:21:00
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lihao1988903

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

梯度洗脱设定好流动相的速度，让洗脱力从低到高就行吧。
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7楼2012-06-15 09:20:03
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克隆大虾

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

有机溶剂的比例应该从小到大...也可以换流动相试一下..
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8楼2012-06-19 01:42:24
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