24小时热门版块排行榜    

查看: 3302  |  回复: 16

霸_霸

新虫 (初入文坛)

[交流] PCR产物继续扩增原来的片段效果会更好吗? 已有13人参与

实际做出来怎么效果不怎么样啊
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

draco1987

木虫 (正式写手)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-06-04 13:38:46
你有没考虑过反应体系本身没优化造成扩增效率不高的情况?PCR产物做模板扩增效果不一定好很多,但是可以屏蔽原模板扩增产生的杂带,所以也不是一无是处。不过,想要2次重复扩增,一定要用保真度非常好的酶,不然扩增造成的碱基错配率会累积到一个很坑的水平。
2楼2012-06-01 15:27:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

霸_霸

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by draco1987 at 2012-06-01 15:27:31
你有没考虑过反应体系本身没优化造成扩增效率不高的情况?PCR产物做模板扩增效果不一定好很多,但是可以屏蔽原模板扩增产生的杂带,所以也不是一无是处。不过,想要2次重复扩增,一定要用保真度非常好的酶,不然扩增 ...

有道理啊
3楼2012-06-01 15:59:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

江苏虞游

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我做过几次,效果还是挺不错的
4楼2012-06-02 13:23:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

嘘嘘巡洋舰

银虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
应该会使碱基误配增加很多吧?
5楼2012-06-02 17:02:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

叶伟伟99

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
会啊,这样模板纯度高,但是PCR条件会有点点改变,效果会更好
6楼2012-06-02 18:45:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wcwluwei

禁虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
本帖内容被屏蔽

7楼2012-06-02 21:24:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

孙启亮

金虫 (著名写手)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
西瓜: 金币+2, 专家考核, 孙哥辛苦哈 2012-06-04 00:10:07
你想做二次PCR是吧,楼上已经说了要用高保真的taq,我估计如果你扩增效果不好的话你是想验证引物的质量和基因表达丰度,其实我觉得你即使没有高保真酶,也能做
8楼2012-06-02 22:17:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

0624410024

金虫 (正式写手)

Begging for knowledge

高保真酶,稀释模板!
每天坚持多一点,以后困难少一点!
9楼2012-06-03 11:04:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

syn1985

木虫 (正式写手)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
西瓜: 金币+2, 鼓励交流 2012-06-04 00:10:16
如果还是扩增原来的片段,那么引物不好和模板结合,这样扩增结果就会不好,所以race都是做巢式PCR的 不懂LZ为啥要PCR产物再扩增一次一样的条带呢 如果只是为了优化扩增结果,那还不如把精力放在优化PCR体系上这样效果会更好
10楼2012-06-03 12:59:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 霸_霸 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 328求调剂,英语六级551,有科研经历 +5 生物工程调剂 2026-03-17 9/450 2026-03-21 23:32 by zhujy1982
[考研] 化学调剂 +5 yzysaa 2026-03-21 5/250 2026-03-21 22:12 by peike
[考研] 材料与化工(0856)304求B区调剂 +3 邱gl 2026-03-20 7/350 2026-03-21 19:05 by 15709483992
[考研] 【考研调剂】化学专业 281分,一志愿四川大学,诚心求调剂 +11 吃吃吃才有意义 2026-03-19 11/550 2026-03-21 18:23 by 学员8dgXkO
[考研] 311求调剂 +3 勇敢的小吴 2026-03-20 3/150 2026-03-21 17:40 by ColorlessPI
[考研] 085601调剂 358分 +3 zzzzggh 2026-03-20 4/200 2026-03-21 10:21 by luoyongfeng
[考研] 南昌大学材料专硕311分求调剂 +6 77chaselx 2026-03-20 6/300 2026-03-21 07:24 by JourneyLucky
[考研] 一志愿天津大学化学工艺专业(081702)315分求调剂 +12 yangfz 2026-03-17 12/600 2026-03-21 03:30 by JourneyLucky
[考研] 083200学硕321分一志愿暨南大学求调剂 +3 innocenceF 2026-03-17 3/150 2026-03-21 02:35 by JourneyLucky
[考研] 308求调剂 +3 阿姐阿姐家啊 2026-03-18 3/150 2026-03-20 23:24 by JourneyLucky
[考研] 一志愿南京理工大学085701资源与环境302分求调剂 +4 葵梓卫队 2026-03-18 6/300 2026-03-20 23:02 by JourneyLucky
[考研] 一志愿中南化学(0703)总分337求调剂 +8 niko- 2026-03-19 9/450 2026-03-20 21:57 by luoyongfeng
[考研] 材料学硕297已过四六级求调剂推荐 +11 adaie 2026-03-19 11/550 2026-03-20 21:30 by laoshidan
[考研] 086500 325 求调剂 +3 领带小熊 2026-03-19 3/150 2026-03-20 18:38 by 尽舜尧1
[考研] 材料学硕318求调剂 +5 February_Feb 2026-03-19 5/250 2026-03-19 23:51 by 23Postgrad
[考研] 考研求调剂 +3 橘颂. 2026-03-17 4/200 2026-03-17 21:43 by 有只狸奴
[考研] 277调剂 +5 自由煎饼果子 2026-03-16 6/300 2026-03-17 19:26 by 李leezz
[考研] 有没有道铁/土木的想调剂南林,给自己招师弟中~ +3 TqlXswl 2026-03-16 7/350 2026-03-17 15:23 by TqlXswl
[考研] 一志愿苏州大学材料工程(085601)专硕有科研经历三项国奖两个实用型专利一项省级立项 +6 大火山小火山 2026-03-16 8/400 2026-03-17 15:05 by 无懈可击111
[考研] 一志愿,福州大学材料专硕339分求调剂 +3 木子momo青争 2026-03-15 3/150 2026-03-17 07:52 by laoshidan
信息提示
请填处理意见