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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 原核表达蛋白变小
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Pushing2012

金虫 (正式写手)

[求助] 原核表达蛋白变小

本人用原核Rosetta，载体PET30做蛋白原核表达，目的基因992bp，预测蛋白大小41kda，每次诱导表达SDS检测，都出现蛋白变小，与对照相比，在27kda左右出现一个非常明显的带，以及在37kda左右出现一个不是特别明显的带，但仔细看还是能看到，在41kda左右没有新条带产生，求解。 另外，第一次做表达用的是BL21，当时只出现37kda的带，镍柱纯化后 纯化得到的蛋白SDS检测又在41kDa,真让人费解，有高人能帮忙解决和解释下这个问题吗
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1楼 2012-05-28 20:22:29
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jqq1985

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜: 金币+2, 鼓励交流 2012-05-31 09:34:11
是不是41kd的条带太浅，上样浓缩条带富集了所以跑胶才看见。以前我们做Codon plus的时候也是会在27左右出现一个额外的条带，当时的解释是氯霉素抗性蛋白（好像是600bp左右）的条带，不知道对不对
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5楼2012-05-30 22:36:28
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