版块导航: 正在加载中...

客户端APP下载

登录注册

应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜

yilanly

银虫 (初入文坛)

应助: 3 (幼儿园)
金币: 393.8
帖子: 48
在线: 71.4小时
虫号: 1326772

[交流] 用RT-PCR检测RNAi 的干扰效果如此诡异，求高手指点

请大家看图吧，我做的是shRNA，做了两次RT了，结果基本相同。很奇怪的是我的weichuli样品（即单纯的细胞培养）的表达量理论上应该是和control一样，但为什么如此低？！！！
求帮助。。。。

这三个柱状图分别是插入打乱序列的siRNA和两条理论上有抑制效果的siRNA

又加了一个仅仅是细胞培养，命名为weichuli

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

格列齐检测波长确定已经有5人回复
脾脏总RNA提取及RT-PCR 已经有4人回复
欧莱雅研发部微生物检测如何已经有10人回复
国内占坑还是出去啊？纠结中，高手指点已经有25人回复
投了Elsevier下的一个期刊，流程比较诡异，求助？已经有23人回复
关于法规的检测限定量限已经有5人回复
rna终于提取出来了，可是反转录pcr（rt pcr）没有条带已经有19人回复
提取RNA与做RT-PCR的问题已经有26人回复
rt-pcr电泳图，求好心虫友帮助分析一下，跪谢。。。已经有14人回复
谁做过倍半硅氧烷silsesquioxane，请过来指点一下啊~ 已经有7人回复
求高手指点：RT-PCR的引物设计已经有18人回复
pcr过程中遇到的诡异现象，求高手解释一下已经有8人回复
向RTPCR高手求助，关于RTPCR的空白对照问题已经有9人回复

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴

1楼 2012-05-24 09:42:44

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

yglky

金虫 (正式写手)

应助: 2 (幼儿园)
金币: 742.5
帖子: 388
在线: 242.9小时
虫号: 476271

★
yilanly(金币+1): 谢谢参与

这两个siRNA序列没有抑制效率。至于空载体对照表达量为什么增加，影响因素可能很多，但是没有明确的解释机理，只能是理论推测。你可以选择换个shRNA载体试试。

赞一下(1人)

25楼2012-05-27 11:38:54

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

普通回帖

yilanly

银虫 (初入文坛)

应助: 3 (幼儿园)
金币: 393.8
帖子: 48
在线: 71.4小时
虫号: 1326772

我又做了一次，用了两种转染方法，LIF2000和PEI结果更是神奇。
看下图

2楼2012-05-24 09:51:37

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

yilanly

银虫 (初入文坛)

应助: 3 (幼儿园)
金币: 393.8
帖子: 48
在线: 71.4小时
虫号: 1326772

引用回帖:

3楼: Originally posted by neu234 at 2012-05-24 09:52:28:

谢谢！
在线等。。。

4楼2012-05-24 09:54:44

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

yilanly

银虫 (初入文坛)

应助: 3 (幼儿园)
金币: 393.8
帖子: 48
在线: 71.4小时
虫号: 1326772

没人做这方面的吗？我做的Raf-1基因的干扰。
我想知道为什么没有干扰的表达量最低。。。。

8楼2012-05-24 10:45:30

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

yuanyeguhong

至尊木虫 (文坛精英)

应助: 7 (幼儿园)
金币: 9811.2
帖子: 10513
在线: 678.5小时
虫号: 1784766

★
yilanly(金币+1): 谢谢参与

路过的，瞅瞅！

11楼2012-05-24 11:33:53

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

yilanly

银虫 (初入文坛)

应助: 3 (幼儿园)
金币: 393.8
帖子: 48
在线: 71.4小时
虫号: 1326772

还是没人回复啊

19楼2012-05-24 14:00:20

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

xiao105

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 52.8
帖子: 5
在线: 5.9小时
虫号: 1155034

★
yilanly(金币+1): 谢谢参与

我设计了三条shRNA，同时用两条或者三条处理的为什么还没有单独一条处理的沉默效果好？

30楼2014-11-21 23:42:30

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

徐州王小健

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 13.8
帖子: 1
在线: 10分钟
虫号: 7185209

★
yilanly(金币+1): 谢谢参与

引用回帖:

25楼: Originally posted by yglky at 2012-05-27 11:38:54
这两个siRNA序列没有抑制效率。至于空载体对照表达量为什么增加，影响因素可能很多，但是没有明确的解释机理，只能是理论推测。你可以选择换个shRNA载体试试。

我也遇到这个情况，未处理组与NC组相比差异很大；而且只转转染试剂组同样差异很大

发自小木虫IOS客户端

31楼2017-09-14 20:14:44

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

简单回复

neu2343楼

2012-05-24 09:52 回复

yilanly(金币+1): 谢谢参与

8673929495楼

2012-05-24 10:00 回复

yilanly(金币+1): 谢谢参与

xiaohuii6楼

2012-05-24 10:35 回复

yilanly(金币+1): 谢谢参与

tangbohejin7楼

2012-05-24 10:40 回复

yilanly(金币+1): 谢谢参与

10102050759楼

2012-05-24 10:48 回复

yilanly(金币+1): 谢谢参与

假大空10楼

2012-05-24 11:08 回复

yilanly(金币+1): 谢谢参与

2270835412楼

2012-05-24 11:41 回复

yilanly(金币+1): 谢谢参与

zywzhangyw13楼

2012-05-24 12:09 回复

yilanly(金币+1): 谢谢参与

祝福

xachenxi14楼

2012-05-24 12:14 回复

yilanly(金币+1): 谢谢参与

20091262215楼

2012-05-24 12:19 回复

yilanly(金币+1): 谢谢参与

祝福

shihao61116楼

2012-05-24 12:39 回复

yilanly(金币+1): 谢谢参与

hr63017楼

2012-05-24 12:47 回复

yilanly(金币+1): 谢谢参与

huijun043218楼

2012-05-24 12:53 回复

yilanly(金币+1): 谢谢参与

lcn52020楼

2012-05-25 22:02 回复

yilanly(金币+1): 谢谢参与

101020507521楼

2012-05-25 22:34 回复

zhuyanmei22楼

2012-05-25 22:52 回复

yilanly(金币+1): 谢谢参与

101020507523楼

2012-05-25 22:54 回复

jztxiaozhou24楼

2012-05-25 23:25 回复

yilanly(金币+1): 谢谢参与

liufuliang26楼

2012-05-27 11:58 回复

yilanly(金币+1): 谢谢参与

fuhanmei27楼

2012-05-27 12:00 回复

yilanly(金币+1): 谢谢参与

liushuyan28楼

2012-05-27 12:03 回复

yilanly(金币+1): 谢谢参与

liuguilin29楼

2012-05-27 12:06 回复

yilanly(金币+1): 谢谢参与

相关版块跳转我要订阅楼主 yilanly 的主题更新