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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 用RT-PCR检测RNAi 的干扰效果如此诡异，求高手指点
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yilanly

银虫 (初入文坛)

[交流] 用RT-PCR检测RNAi 的干扰效果如此诡异，求高手指点

请大家看图吧，我做的是shRNA，做了两次RT了，结果基本相同。很奇怪的是我的weichuli样品（即单纯的细胞培养）的表达量理论上应该是和control一样，但为什么如此低？！！！
求帮助。。。。

这三个柱状图分别是插入打乱序列的siRNA和两条理论上有抑制效果的siRNA



又加了一个仅仅是细胞培养，命名为weichuli
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1楼 2012-05-24 09:42:44
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yglky

金虫 (正式写手)
★
yilanly(金币+1): 谢谢参与
这两个siRNA序列没有抑制效率。至于空载体对照表达量为什么增加，影响因素可能很多，但是没有明确的解释机理，只能是理论推测。你可以选择换个shRNA载体试试。
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25楼2012-05-27 11:38:54
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yilanly

银虫 (初入文坛)
我又做了一次，用了两种转染方法，LIF2000和PEI结果更是神奇。
看下图
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2楼2012-05-24 09:51:37
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yilanly

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by neu234 at 2012-05-24 09:52:28:

谢谢！
在线等。。。
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4楼2012-05-24 09:54:44
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yilanly

银虫 (初入文坛)
没人做这方面的吗？我做的Raf-1基因的干扰。
我想知道为什么没有干扰的表达量最低。。。。
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8楼2012-05-24 10:45:30
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