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yilanly

银虫 (初入文坛)


[交流] 用RT-PCR检测RNAi 的干扰效果如此诡异,求高手指点

请大家看图吧,我做的是shRNA,做了两次RT了,结果基本相同。很奇怪的是我的weichuli样品(即单纯的细胞培养)的表达量理论上应该是和control一样,但为什么如此低?!!!
求帮助。。。。

这三个柱状图分别是插入打乱序列的siRNA和两条理论上有抑制效果的siRNA



又加了一个仅仅是细胞培养,命名为weichuli
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徐州王小健

新虫 (初入文坛)



yilanly(金币+1): 谢谢参与
引用回帖:
25楼: Originally posted by yglky at 2012-05-27 11:38:54
这两个siRNA序列没有抑制效率。至于空载体对照表达量为什么增加,影响因素可能很多,但是没有明确的解释机理,只能是理论推测。你可以选择换个shRNA载体试试。

我也遇到这个情况,未处理组与NC组相比差异很大;而且只转转染试剂组同样差异很大

发自小木虫IOS客户端
31楼2017-09-14 20:14:44
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yilanly

银虫 (初入文坛)


我又做了一次,用了两种转染方法,LIF2000和PEI结果更是神奇。
看下图


2楼2012-05-24 09:51:37
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yilanly

银虫 (初入文坛)


引用回帖:
3楼: Originally posted by neu234 at 2012-05-24 09:52:28:

谢谢!
在线等。。。
4楼2012-05-24 09:54:44
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yilanly

银虫 (初入文坛)


没人做这方面的吗?我做的Raf-1基因的干扰。
我想知道为什么没有干扰的表达量最低。。。。
8楼2012-05-24 10:45:30
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