24小时热门版块排行榜    

查看: 2137  |  回复: 7
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

光武故里

木虫 (小有名气)

[求助] 请大家帮我分析一下这张植物块根中提取的基因组DNA电泳图片

今天下午提了一种植物块根的基因组DNA,因为其富含多糖,使用的是改良的CTAB法,采取以下流程:首先在装有粉状样品的离心管中加入2×CTAB裂解液(内含3% PVP)600ul 以及100ul β-巯基乙醇,65℃水浴60min,然后用A【氯仿:异戊醇/24:1】以及B【酚:氯仿:异戊醇/25:24:1】交替抽提后离心,先后顺序依次为:A——A——B——A——B——A,接着离心取上清液,加入-20℃预冷的异丙醇,并放置-20℃冰箱,60min后取出离心,得沉淀(但是实际情况是离心后并无可见的沉淀),用70%的乙醇小心洗涤2次,后用无水乙醇洗涤一次,风干沉淀,加入100ul TE溶解。

其中离心参数为:4℃,12000rpm,10min

电泳检测如图所示:左边是MARKER,最大片段长5000bp,右边是提的DNA,明显感觉不对头啊,请各位帮忙分析找找原因,十分谢谢
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

笑西少

银虫 (小有名气)

楼主可以用稍微低一点浓度的胶的
天然产物化学
8楼2014-06-11 23:15:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

光武故里

木虫 (小有名气)

补充:胶是2%的,100V,30min
2楼2012-05-21 18:43:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kuaile-RJ

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
西瓜: 金币+3, 鼓励交流~欢迎常来~ 2012-05-22 08:31:51
光武故里: 金币+2, 非常感谢! 2012-05-22 09:41:43
从你的电泳图看,提的效果还可以啊,最上面的一条带应该就是基因组DNA啊,下面的是RNA,而且没有较多多糖污染啊(稍微有一些),点样孔比较干净。不知道楼主测浓度了没有,可以考虑纯化,加RNA酶除去RNA,不过要看楼主提DNA干什么用了,呵呵!还有沉淀后离心一步应该是有沉淀的,可能是透明状的没观察到而已,而且沉淀多了也不好,大都是杂质,不知道楼主起始材料量是多大呢?
3楼2012-05-22 00:04:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

光武故里

木虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by kuaile-RJ at 2012-05-22 00:04:35:
从你的电泳图看,提的效果还可以啊,最上面的一条带应该就是基因组DNA啊,下面的是RNA,而且没有较多多糖污染啊(稍微有一些),点样孔比较干净。不知道楼主测浓度了没有,可以考虑纯化,加RNA酶除去RNA,不过要看楼

RJ,非常感谢,我始终觉得最上面的DNA片段不够大(离MARKER5000bp的好近),是不是电压100v太高,没跑开的原因呢?
4楼2012-05-22 09:46:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 285化工学硕求调剂(081700) +9 柴郡猫_ 2026-03-12 9/450 2026-03-17 10:18 by Sammy2
[考研] 278求调剂 +3 Yy7400 2026-03-13 3/150 2026-03-17 08:24 by laoshidan
[考研] 机械专硕325,寻找调剂院校 +3 y9999 2026-03-15 5/250 2026-03-16 19:58 by y9999
[考研] 环境工程调剂 +6 大可digkids 2026-03-16 6/300 2026-03-16 17:16 by barlinike
[考研] 085600调剂 +5 漾漾123sun 2026-03-12 6/300 2026-03-16 15:58 by 漾漾123sun
[考研] 308求调剂 +3 是Lupa啊 2026-03-16 3/150 2026-03-16 10:07 by 求调剂zz
[考研] 080500,材料学硕302分求调剂学校 +4 初识可乐 2026-03-14 5/250 2026-03-14 21:08 by peike
[考研] 一志愿哈工大材料324分求调剂 +5 闫旭东 2026-03-14 5/250 2026-03-14 14:53 by 木瓜膏
[考研] 311求调剂 +5 牛乳糖的卡卡 2026-03-10 5/250 2026-03-14 00:05 by JourneyLucky
[考研] 311求调剂 +8 zchqwer 2026-03-10 8/400 2026-03-14 00:01 by JourneyLucky
[考研] 材料工程,326分,求调剂 +6 KRSLSR 2026-03-10 6/300 2026-03-13 23:47 by JourneyLucky
[考研] 285 求调剂 资源与环境 一志愿北京化工大学 +3 未名考生 2026-03-10 3/150 2026-03-13 23:04 by JourneyLucky
[考研] 337一志愿华南理工0805材料求调剂 +7 mysdl 2026-03-11 9/450 2026-03-13 22:43 by JourneyLucky
[考研] 求材料调剂 085600英一数二总分302 前三科235 精通机器学习 一志愿哈工大 +4 林yaxin 2026-03-12 4/200 2026-03-13 22:04 by 星空星月
[考研] 四川大学085601材料工程专硕 初试294求调剂 +4 祝我们好在冬天 2026-03-11 4/200 2026-03-13 21:39 by peike
[考研] 315求调剂 +9 小羊小羊_ 2026-03-11 10/500 2026-03-13 21:13 by SXNU李老师
[考研] 【考研调剂求收留】 +3 Ceciilia 2026-03-11 3/150 2026-03-13 20:18 by JourneyLucky
[考研] 材料工程调剂 +4 咪咪空空 2026-03-11 4/200 2026-03-13 19:57 by JourneyLucky
[考博] 26读博 +4 Rui135246 2026-03-12 10/500 2026-03-13 07:15 by gaobiao
[考博] 26申博求助 +3 跳跃饼干 2026-03-10 4/200 2026-03-10 21:15 by Tntcnn
信息提示
请填处理意见