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一度冰火

新虫 (初入文坛)

[求助] 菌液PCR没东西,但是提完质粒能跑出来条带,为什么啊?

本人做目的基因和PMD18-T连接,挑菌、摇菌后,对目的基因做菌液PCR筛选阳性菌株时没条带,但是我对摇出来的菌液提取质粒,然后对质粒进行目的基因PCR时跑出目的条带了,奇怪了,我前面有一次对菌液进行PCR时能跑出来,菌液PCR感觉时灵时不灵,我的PCR体系:ddH2O:14.25,BUFFER:2.5,DNTP:1,引物1:1,引物2:1,菌液:5,Taq:0.25,总共是25微升体系,哪位大侠指点下小弟呢。
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gayy1990602

铜虫 (初入文坛)

首先,菌液PCR时你的同时做阳性对照,看是不是体系问题,第二,有可能假阳性也有可能。
16楼2015-01-26 11:17:11
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