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da_da

金虫 (小有名气)


[交流] 谁用过Fermentas的T4连接酶?

谁用过Fermentas的T4连接酶啊?我连的是粘性末端,说明书上说22度10min中就行,我把时间延长到了2h,也连不上,怎么回事?大家都用的什么条件啊
注:目的片段和载体都切开了,感受态也没有问题。
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qiao9950

金虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
16℃过夜连接。确定vector和insert DNA都切开了吗?我前段时间做的,2600和1400的,开始连不上,后来发现有个酶要连续切22小时才行,再后来就连上了。
17楼2012-05-21 16:20:20
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lillian菲

银虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我们一般是室温过夜酶连,或者在37度2小时,你可以试试
3楼2012-05-17 11:28:22
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真心话

新虫 (初入文坛)


★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
da_da: 金币+1 2012-05-17 18:56:27
我们都是16℃过夜连接,效果还是不错的。
4楼2012-05-17 12:52:26
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da_da

金虫 (小有名气)


引用回帖:
4楼: Originally posted by 真心话 at 2012-05-17 12:52:26:
我们都是16℃过夜连接,效果还是不错的。

是fermentas的酶吗
5楼2012-05-17 13:24:02
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