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jmmchen木虫 (正式写手)
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求助MSP凝胶电泳该如何选择已有2人参与
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请问大家有做甲基化特异性PCR的吗??? 目前,我的研究课题是有关DNA甲基化的,经过PCR之后,我一般都是跑2%琼脂糖凝胶电泳,但最终结果一般会出现以下几个问题: (1)对于我选择的目的基因,正常人的骨髓中应当是无甲基化的,文献报道正常人中应该没有甲基化。但我的电泳跑出来之后是有甲基化的。不知道是我的引物设计不合理,还是其他原因?? (2)导师觉得我跑的条带不好看,希望改用PAGE凝胶进行电泳,我自认为这种办法不可取。不知道大家做甲基化PCR的,有用PAGE胶进行电泳的吗?? 如果有用PAGE胶的,请传授一下经验吧。 非常感谢!!! ![]() ![]() [ 来自科研家族 生物医药家族 ] |
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jmmchen
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10楼2012-09-18 17:48:56
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2楼2012-05-20 23:19:09
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4楼2012-05-22 14:35:50
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【答案】应助回帖
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西瓜: 金币+2, 鼓励下 2012-05-23 21:48:59
您说的这个产品应该不是INVITROGE公司的,应该是QIAGEN的吧!呵呵!一般情况下,按照操作流程进行操作不会有什么问题的。一般引物设计软件采用Methl primer就可以的。至于您说的这个酶(2 GoTaq green master mix)应该是Promega的。亚硫酸盐的修饰的盒子还可以,但是与这个酶的匹配性如何!您这边有没有使用这个酶跑出来的条带呢?有的话,可以发到我的信箱一份,我的信箱是:tech@aderr.com ![]() |
5楼2012-05-23 09:46:51
jmmchen
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