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jmmchen木虫 (正式写手)
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[求助]
求助MSP凝胶电泳该如何选择 已有2人参与
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请问大家有做甲基化特异性PCR的吗？？？ 目前，我的研究课题是有关DNA甲基化的，经过PCR之后，我一般都是跑2%琼脂糖凝胶电泳，但最终结果一般会出现以下几个问题： （1）对于我选择的目的基因，正常人的骨髓中应当是无甲基化的，文献报道正常人中应该没有甲基化。但我的电泳跑出来之后是有甲基化的。不知道是我的引物设计不合理，还是其他原因？？ （2）导师觉得我跑的条带不好看，希望改用PAGE凝胶进行电泳，我自认为这种办法不可取。不知道大家做甲基化PCR的，有用PAGE胶进行电泳的吗？？ 如果有用PAGE胶的，请传授一下经验吧。 非常感谢！！！  [ 来自科研家族 生物医药家族 ] |
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 表观遗传 |
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jmmchen
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4楼2012-05-22 14:35:50
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3楼2012-05-22 09:53:42
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【答案】应助回帖
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您说的这个产品应该不是INVITROGE公司的，应该是QIAGEN的吧！呵呵！一般情况下，按照操作流程进行操作不会有什么问题的。一般引物设计软件采用Methl primer就可以的。至于您说的这个酶（2 GoTaq green master mix）应该是Promega的。亚硫酸盐的修饰的盒子还可以，但是与这个酶的匹配性如何！您这边有没有使用这个酶跑出来的条带呢？有的话，可以发到我的信箱一份，我的信箱是：tech@aderr.com |
5楼2012-05-23 09:46:51
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