24小时热门版块排行榜    

查看: 487  |  回复: 2

mimio113

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助关于Ni-Agarose His 蛋白纯化的问题

这两天做了纯化,使用康为世纪的琼脂糖,使用方法在下面文件中
表达菌体为大肠杆菌
蛋白为包涵体
今天我纯化后,直接取流穿液和洗脱液加SDS煮沸上样跑电泳,结果没有条带,请问是什么原因呢?
请问纯化后收集的蛋白样品要浓缩处理吗?
请问大肠杆菌超声破胞是用什么参数能达到较好的破碎率?[ Last edited by mimio113 on 2012-5-7 at 23:17 ]
回复此楼

» 本帖附件资源列表

  • 欢迎监督和反馈:小木虫仅提供交流平台,不对该内容负责。
    本内容由用户自主发布,如果其内容涉及到知识产权问题,其责任在于用户本人,如对版权有异议,请联系邮箱:xiaomuchong@tal.com
  • 附件 1 : Ni-Agarose.pdf
  • 2012-05-07 23:02:00, 352.6 K

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

indica

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-05-08 13:54:32
跑个总蛋白,直接取菌液煮沸后上样。确定表达出蛋白了再纯化。

表达出了蛋白也不一定能挂柱,有时HIS会被包裹在内部。可接在蛋白另一端试试。
2楼2012-05-08 11:34:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mimio113

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by indica at 2012-05-08 11:34:07:
跑个总蛋白,直接取菌液煮沸后上样。确定表达出蛋白了再纯化。

表达出了蛋白也不一定能挂柱,有时HIS会被包裹在内部。可接在蛋白另一端试试。

跑了总蛋白,目的蛋白表达量很大的
3楼2012-05-09 00:58:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 mimio113 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 中国科学院深圳先进技术研究院-光纤传感课题组招生-中国科学院大学、深圳理工大学联培 +4 YangTyu1 2026-03-26 4/200 2026-03-26 17:17 by brand12388
[考研] 321求调剂 +4 wasdssaa 2026-03-26 4/200 2026-03-26 16:25 by 不吃魚的貓
[考研] 289求调剂 +17 硕星赴 2026-03-23 17/850 2026-03-26 16:18 by 不吃魚的貓
[考研] 材料277求调剂 +5 min3 2026-03-24 5/250 2026-03-26 15:13 by zzll406
[考研] 材料与化工304求B区调剂 +3 邱gl 2026-03-26 5/250 2026-03-26 13:33 by 邱gl
[考研] 寻找调剂 +5 倔强芒? 2026-03-21 8/400 2026-03-26 13:25 by 0906ljy
[考研] 化学调剂一志愿上海交通大学336分-本科上海211 +4 小鱼爱有机 2026-03-25 4/200 2026-03-26 10:19 by aa331100
[考研] 一志愿上海交大生物与医药专硕324分,求调剂 +6 jiajunX 2026-03-22 6/300 2026-03-25 23:05 by licg0208
[考研] 299求调剂 +4 15188958825 2026-03-25 4/200 2026-03-25 22:56 by 418490947
[考研] 308求调剂 +5 墨墨漠 2026-03-25 5/250 2026-03-25 22:19 by 544594351
[考研] 290分调剂求助 +3 吉祥止止陈 2026-03-25 3/150 2026-03-25 19:58 by barlinike
[考研] 347求调剂 +4 L when 2026-03-25 4/200 2026-03-25 13:37 by cocolv
[考研] 289求调剂 +9 怀瑾握瑜l 2026-03-20 9/450 2026-03-25 11:02 by userper
[考研] 材料考研调剂生 +3 黄粱一梦千年 2026-03-24 3/150 2026-03-24 17:00 by barlinike
[考研] 277分求调剂,跨调材料 +3 考研调剂lxh 2026-03-24 3/150 2026-03-24 13:52 by JourneyLucky
[考研] 一志愿河北工业大学0817化工278分求调剂 +7 jhybd 2026-03-23 12/600 2026-03-24 09:03 by jhybd
[考研] 材料/农业专业,07/08开头均可,过线就行 +3 呵唔哦豁 2026-03-23 4/200 2026-03-23 22:30 by 汪!?!
[考研] 361求调剂 +3 Glack 2026-03-22 3/150 2026-03-23 22:03 by fuyu_
[考研] 一志愿中南化学(0703)总分337求调剂 +9 niko- 2026-03-19 10/500 2026-03-22 16:08 by ColorlessPI
[考研] 266求调剂 +3 哇呼哼呼哼 2026-03-20 3/150 2026-03-21 16:46 by barlinike
信息提示
请填处理意见