| 查看: 2081 | 回复: 7 | ||
[求助]
求助：重组质粒酶切问题！请大家帮我解决一下，急！
|
|
PET-32a原核表达载体与IL-10目的片段连接后，大提质粒进行酶切鉴定。 上图从左到右依次为：1kb的marker（宝生物），重组质粒，BamHI单酶切，BanHI+HindIII双酶切，DL-1000的marker（宝生物）。 我的目的片段大小为537bp，原核载体大小5.9kb。有几个问题想请教大家： （1）为什么1kb的marker没能跑开（我做的是1%的胶）？ （2）为什么重组质粒会出现两条带，且最下面的很亮（是不是我质粒提取的问题）？ （3）双酶切怎么没看到目的片段？（这个图片肯定是看不到的，当时拍照的时候师兄说隐隐约约能看到一点点，我的酶切体系是20微升，是不是因为体系太小，切下的目的片度浓度不高所以才看不到？） （4）上面这个图能不能排除载体与片段没有连上的可能性？ 麻烦大家帮我解决一下，谢谢！  PET-IL10重组质粒酶切结果 |
回复此楼» 猜你喜欢
阴阳离子交换剂！！！！
已经有3人回复
-
二苄基磷酰氯，磷酸接酚羟基，
已经有11人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有197人回复
-
二苄基磷酰氯，磷酰氯
已经有10人回复
-
酸酐或者羧酸酰氯化
已经有15人回复
-
酚羟基接入磷酸，磷酸酯化
已经有26人回复
-
土壤中可溶性有机碳种类
已经有1人回复
-
韩国海关检测食用植物油中的苯并芘用的是哪种方法？
已经有0人回复
-
现有pP43NMK质粒，想换了pHT43，或者其他芽孢杆菌过表达质粒
已经有5人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 重组质粒丢失一个碱基是否影响表达
已经有13人回复
- 十万火急，重组质粒酶切只有一条带，测序有结果，但反复说我质粒浓度很低
已经有16人回复
- 【求助/交流】重组质粒连接
已经有3人回复
- 重组质粒双酶切问题
已经有5人回复
- 求助：用pXMJ19构建的重组质粒在谷氨酸棒杆菌不表达，应该如何解决？
已经有6人回复
- 【求助】基因克隆T载体酶切问题等
已经有8人回复
- 【求助】急！请大家帮忙解决几个cif错误~
已经有10人回复
- 【求助/交流】试剂盒提取重组质粒的A260/A280=2.08,求帮忙分析一下
已经有4人回复
- 【求助/交流】关于重组质粒的构建，总是失败，希望高手指点一下啊～～
已经有16人回复
- 【求助/交流】fermentas的双酶切问题
已经有10人回复
- 【求助/交流】重组质粒PCR的taq酶选择！
已经有11人回复
cheng_xiao
木虫 (小有名气)
- MolEPI: 2
- 应助: 59 (初中生)
- 金币: 3645.2
- 帖子: 273
- 在线: 62.7小时
- 虫号: 1553648
- 注册: 2011-12-27
- 性别: GG
- 专业: 植物遗传学
2楼2012-05-05 13:20:11
3楼2012-05-05 14:56:04
张宏宇123
金虫 (著名写手)
- 应助: 52 (初中生)
- 金币: 388.9
- 帖子: 1084
- 在线: 93.8小时
- 虫号: 1766866
- 注册: 2012-04-20
- 性别: MM
- 专业: 微生物生理与生物化学
4楼2012-05-05 15:25:42
5楼2012-05-09 20:09:54
6楼2012-05-09 23:16:59
张宏宇123
金虫 (著名写手)
- 应助: 52 (初中生)
- 金币: 388.9
- 帖子: 1084
- 在线: 93.8小时
- 虫号: 1766866
- 注册: 2012-04-20
- 性别: MM
- 专业: 微生物生理与生物化学
7楼2012-05-10 10:05:27
8楼2013-03-24 21:57:12
20