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求助：重组质粒酶切问题！请大家帮我解决一下，急！
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PET-32a原核表达载体与IL-10目的片段连接后，大提质粒进行酶切鉴定。 上图从左到右依次为：1kb的marker（宝生物），重组质粒，BamHI单酶切，BanHI+HindIII双酶切，DL-1000的marker（宝生物）。 我的目的片段大小为537bp，原核载体大小5.9kb。有几个问题想请教大家： （1）为什么1kb的marker没能跑开（我做的是1%的胶）？ （2）为什么重组质粒会出现两条带，且最下面的很亮（是不是我质粒提取的问题）？ （3）双酶切怎么没看到目的片段？（这个图片肯定是看不到的，当时拍照的时候师兄说隐隐约约能看到一点点，我的酶切体系是20微升，是不是因为体系太小，切下的目的片度浓度不高所以才看不到？） （4）上面这个图能不能排除载体与片段没有连上的可能性？ 麻烦大家帮我解决一下，谢谢！  PET-IL10重组质粒酶切结果 |
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5楼2012-05-09 20:09:54
cheng_xiao
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张宏宇123
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4楼2012-05-05 15:25:42