| 查看: 2366 | 回复: 7 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[求助]
求助：重组质粒酶切问题！请大家帮我解决一下，急！
|
||
|
PET-32a原核表达载体与IL-10目的片段连接后，大提质粒进行酶切鉴定。 上图从左到右依次为：1kb的marker（宝生物），重组质粒，BamHI单酶切，BanHI+HindIII双酶切，DL-1000的marker（宝生物）。 我的目的片段大小为537bp，原核载体大小5.9kb。有几个问题想请教大家： （1）为什么1kb的marker没能跑开（我做的是1%的胶）？ （2）为什么重组质粒会出现两条带，且最下面的很亮（是不是我质粒提取的问题）？ （3）双酶切怎么没看到目的片段？（这个图片肯定是看不到的，当时拍照的时候师兄说隐隐约约能看到一点点，我的酶切体系是20微升，是不是因为体系太小，切下的目的片度浓度不高所以才看不到？） （4）上面这个图能不能排除载体与片段没有连上的可能性？ 麻烦大家帮我解决一下，谢谢！  PET-IL10重组质粒酶切结果 |
回复此楼» 猜你喜欢
为什么蛋白质氨基酸测定大家都测17种?
已经有5人回复
-
《灰分记：我与坩埚的“灰烬”之恋》
已经有3人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有189人回复
-
求助 食品检验工（基础知识），中国劳动社会出版社 电子版
已经有5人回复
-
胶体几丁质的结晶度？
已经有0人回复
-
诚挚招收全日制博士！！！中国农业科学院麻类研究所谭志坚研究员课题组招收博士
已经有2人回复
-
三甲基羟乙基丙二胺的合成路线
已经有5人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
重组质粒丢失一个碱基是否影响表达
已经有13人回复- 十万火急，重组质粒酶切只有一条带，测序有结果，但反复说我质粒浓度很低
已经有16人回复
- 重组质粒双酶切问题
已经有5人回复
- 求助：用pXMJ19构建的重组质粒在谷氨酸棒杆菌不表达，应该如何解决？
已经有6人回复
- 【求助】基因克隆T载体酶切问题等
已经有8人回复
- 【求助】急！请大家帮忙解决几个cif错误~
已经有10人回复
- 【求助/交流】试剂盒提取重组质粒的A260/A280=2.08,求帮忙分析一下
已经有4人回复
- 【求助/交流】关于重组质粒的构建，总是失败，希望高手指点一下啊～～
已经有16人回复
- 【求助/交流】重组质粒PCR的taq酶选择！
已经有11人回复
张宏宇123
金虫 (著名写手)
- 应助: 52 (初中生)
- 金币: 388.9
- 帖子: 1084
- 在线: 93.8小时
- 虫号: 1766866
- 注册: 2012-04-20
- 性别: MM
- 专业: 微生物生理与生物化学
7楼2012-05-10 10:05:27
cheng_xiao
木虫 (小有名气)
- MolEPI: 2
- 应助: 59 (初中生)
- 金币: 3645.2
- 帖子: 273
- 在线: 62.7小时
- 虫号: 1553648
- 注册: 2011-12-27
- 性别: GG
- 专业: 植物遗传学
2楼2012-05-05 13:20:11
3楼2012-05-05 14:56:04
张宏宇123
金虫 (著名写手)
- 应助: 52 (初中生)
- 金币: 388.9
- 帖子: 1084
- 在线: 93.8小时
- 虫号: 1766866
- 注册: 2012-04-20
- 性别: MM
- 专业: 微生物生理与生物化学
4楼2012-05-05 15:25:42