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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » Western 时如何确定抗体浓度
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yueliangwan

铁虫 (小有名气)

[交流] Western 时如何确定抗体浓度

各位虫友们，大家在做Western 时，是如何确定抗体浓度的，抗体浓度过高会对结果产生什么不利影响吗？
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1楼 2012-05-03 12:11:35
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sesame_oil

荣誉版主 (文坛精英)
★
yueliangwan(金币+1): 谢谢参与
来学习了
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2楼2012-05-03 12:35:05
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308630949

银虫 (小有名气)
★
yueliangwan(金币+1): 谢谢参与
你是指1抗的浓度还是2抗的浓度？
封阻是用明胶还是什么？还有就是你一抗的特异性怎么样？这些都有关系的。楼主的条件太少，我没法给你分析
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4楼2012-05-03 20:44:14
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vinie

银虫 (小有名气)
★
yueliangwan(金币+1): 谢谢参与
一般说明书上都会有推荐稀释比例，然后再根据文献上的经验值来优化一下
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5楼2012-05-04 10:50:12
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karin

木虫 (小有名气)
★
yueliangwan(金币+1): 谢谢参与
一抗的话可以按说明书稀释，如果是自己的特异性抗体就需要做梯度稀释确定效价了
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6楼2012-05-04 12:46:12
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涛声依旧本人

银虫 (初入文坛)
★
yueliangwan(金币+1): 谢谢参与
浓度的话按推荐的试呗，二抗浓度过高的话，膜背景会较高，条带不易看清，浓度弄高了，那是浪费啊，那贵哦
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7楼2012-05-05 09:37:13
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neu234

木虫之王 (文学泰斗)
★
yueliangwan(金币+1): 谢谢参与
还是没有正确回答问题的，我也不清楚
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8楼2012-05-05 09:48:19
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yuluoqiutong

木虫 (正式写手)
★
yueliangwan(金币+1): 谢谢参与
一抗如果是自己制备的话就按1:100或1:200的比例就好了，二抗一般是买的吧，按1:1000或1:2000就可以了
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9楼2012-05-05 17:26:14
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yangy1220

新虫 (职业作家)
★
yueliangwan(金币+1): 谢谢参与
祝福楼主
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12楼2012-05-05 19:14:57
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2011加油

银虫 (正式写手)
★
yueliangwan(金币+1): 谢谢参与
5楼的是正解。参考抗体说明及相关文献，自己再做实验摸索出合适浓度。
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13楼2012-05-05 21:53:44
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tangbohejin3楼
2012-05-03 12:40   回复  
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hifishm10楼
2012-05-05 17:48   回复  
yueliangwan(金币+1): 谢谢参与
nanmann11楼
2012-05-05 18:20   回复  
yueliangwan(金币+1): 谢谢参与
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