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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » BCA法计算浓度
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willielyt

木虫 (正式写手)

[求助] BCA法计算浓度

我想请问下，我用BCA法测完样品后，样品的浓度应该是根据标曲的位置，直接定义浓度，还是要算出蛋白质量，再除以我加样的体积？
我之前是直接定义浓度，比如大概测定样品OD在0.45的位置，根据标曲判定，大概是40ug/ml,这样子正确吗？有人要告诉我这样子不正确，因为我要把加的工作液的体积换算进去，这样子的浓度才是正确的
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我从小就是个...好孩子^^
1楼 2013-07-10 09:25:26
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2013-07-11 12:22:57
willielyt: 金币+1, ★有帮助 2013-07-12 00:03:04
这要看你绘制标准曲线时BSA的浓度是直接用的样品浓度，还是工作液的浓度了。我通常是用BSA标准曲线绘制成样品浓度，然后根据测定样品的稀释度计算。
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2楼2013-07-11 08:00:37
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willielyt

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-07-11 08:00:37
这要看你绘制标准曲线时BSA的浓度是直接用的样品浓度，还是工作液的浓度了。我通常是用BSA标准曲线绘制成样品浓度，然后根据测定样品的稀释度计算。

额，因为我样品的蛋白含量很少，因此都没稀释直接测的，所以我就说，应该根据样品浓度的标曲，直接定义我的样品的浓度就可以了吧？
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我从小就是个...好孩子^^
3楼2013-07-12 00:04:01
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
willielyt: 金币+3, ★★★★★最佳答案, 谢谢，我去实验室找下这个试剂盒的说明书 2013-07-12 00:36:18
引用回帖:
3楼: Originally posted by willielyt at 2013-07-12 00:04:01
额，因为我样品的蛋白含量很少，因此都没稀释直接测的，所以我就说，应该根据样品浓度的标曲，直接定义我的样品的浓度就可以了吧？...

是的。此外，一般买BCA试剂的说明书上有标准曲线如何绘制，浓度怎样计算的的方法。
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4楼2013-07-12 00:18:19
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浮帅古

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
willielyt: 金币+1, ★★★★★最佳答案, 我这也是用的这个试剂盒，我去找找，谢谢呢 2013-07-12 00:36:42
gyesang: 金币+2, 鼓励分享经验！ 2013-07-12 00:57:27
我们实验室用thermo的BCA试剂盒，和2楼方法一样，根据说明书的方法建立标曲，算浓度时乘以样品的稀释度
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努力爱！
5楼2013-07-12 00:25:20
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