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cuipibird

银虫 (小有名气)

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[求助] 怎样诱导大肠杆菌对不可溶性包涵体的表达？

我想获得由大肠杆菌培养产生的不可溶性包涵体，但是老是得到可溶性的蛋白，不知道怎样控制条件，对吸光度，温度，氧气，诱导剂，培养时间有什么特殊要求？

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1楼 2012-04-29 19:30:09

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cuipibird

银虫 (小有名气)

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引用回帖:

2楼: Originally posted by biowandy at 2012-04-29 22:56:48:
哥们，你是人才，人家是要可溶的，不要包涵体，你也好包涵体不要可溶的，为啥啊

不过给你一个意见，第一37度培养，第二，iptg诱导浓度增加到10mM，第三在od到1以后再诱导，培养时间4小时够了，最好减少氧气 ...

呵呵，大家研究的方向不同，如果用包涵体的话得到的目的蛋白比较纯谢谢啦！

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3楼2012-04-30 08:02:35

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biowandy

木虫 (正式写手)

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哥们，你是人才，人家是要可溶的，不要包涵体，你也好包涵体不要可溶的，为啥啊

不过给你一个意见，第一37度培养，第二，iptg诱导浓度增加到10mM，第三在od到1以后再诱导，培养时间4小时够了，最好减少氧气供应，比如在诱导的时候把体积加大，

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cuipibird

2楼2012-04-29 22:56:48

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bbnxmc

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引用回帖:

3楼: Originally posted by cuipibird at 2012-04-30 08:02:35
呵呵，大家研究的方向不同，如果用包涵体的话得到的目的蛋白比较纯谢谢啦！...

刚入此行，长知识了……

加油

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4楼2014-06-24 20:52:27

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